Question

9．2014年11月14日，第三軍醫(yī)大援利醫(yī)療隊從北京出發(fā)前往利比亞，幫助防控埃博拉疫情，埃博拉病毒（EBO）呈纖維狀，是一種烈性的、泛嗜性的RNA病毒，它首先破壞吞噬細胞，其次是肝、脾等細胞，進而導致血管通透性增加，出現(xiàn)嚴重的出血熱現(xiàn)象，EBO衣殼上的包膜蛋白能被宿主細胞強烈識別，請回答下列相關(guān)問題：
（1）人體感染EBO后，血液中可檢測到相應抗體，抗體由漿細胞產(chǎn)生，但感染者的血清中很難形成高濃度的抗體，這是因為病毒侵染并破壞巨噬細胞，影響抗原呈遞，阻斷了體液免疫的發(fā)生．
（2）EBO基因組為單股負鏈RNA，負鏈RNA的互補鏈才能與核糖體結(jié)合，進而翻譯出蛋白質(zhì)，該過程是否符合遺傳信息傳遞的中心法則？是（填“是”或“否”）．
（3）當前研發(fā)抗EBO的疫苗仍是主要的預防手段，圖1表示轉(zhuǎn)基因技術(shù)生產(chǎn)EBO蛋白疫苗的基本過程，圖2中neo是新霉素抗性基因，amp表示氨芐青霉素抗性基因，ori是質(zhì)粒的復制子，限制酶BamHⅠ、HindⅡ、PstⅠ、BgLⅡ作用位點如圖3．
①圖1中的目的基因是包裹蛋白基因，此方法制備的疫苗比直接利用病毒研制疫苗的方法更安全，其原因是蛋白質(zhì)不具侵染性，不會破壞細胞結(jié)構(gòu)．
②要能在大腸桿菌中不斷表達目的基因，同時又能提高重組效率，選擇的限制酶是BglII、BamHI．
③要篩選出成功導入重組質(zhì)粒的大腸桿菌，并準確定位所需大腸桿菌的菌落，實驗室至少需要兩種培養(yǎng)基，他們分別是只含兩種抗生素的培養(yǎng)基和只含新霉素的培養(yǎng)基兩種培養(yǎng)基．

Answer 1

分析 分析題圖：
圖1：圖1表示轉(zhuǎn)基因技術(shù)生產(chǎn)EBO蛋白疫苗與重組病毒粒子疫苗的基本過程．
圖2：圖6是質(zhì)粒結(jié)構(gòu)示意圖，其中neo是新霉素抗性基因，amp表示氨芐青霉素抗性基因，ori是質(zhì)粒的復制子，該質(zhì)粒中有限制酶BamHⅠ、HindⅢ、PstⅠ、BglⅡ的作用位點．
圖3：圖3是含有目的基因的外源DNA分子．

解答 解：（1）抗體是由漿細胞分泌的，由于病毒侵染并破壞巨噬細胞，影響抗原呈遞，阻斷了體液免疫的發(fā)生，所以感染者的血清中很難形成高濃度的抗體．
（2）EBO基因組為單股負鏈RNA，負鏈RNA的互補鏈才能與核糖體結(jié)合，進而翻譯出蛋白質(zhì)，說明該過程符合遺傳信息傳遞的中心法則，EBO基因在人體細胞內(nèi)表達蛋白質(zhì)的過程是：RNA→RNA→蛋白質(zhì)．
（3）①根據(jù)題干信息和圖1可知該基因工程的目的基因是包裹蛋白基因，通過該過程合成的蛋白質(zhì)不具侵染性，不會破壞細胞結(jié)構(gòu)，所以比直接利用病毒研制疫苗的方法更安全．
②質(zhì)粒中含有限制酶BamHⅠ、HindⅢ、PstⅠ、BglⅡ作用位點，但若用限制酶HindⅢ切割會破壞目的基因，若用限制酶PstⅠ切割會破壞復制子，因此，要能在大腸桿菌中不斷表達目的基因，同時又能提高重組效率，選擇的限制酶是BglII、BamHI．
③用限制酶BglII、BamHI切割會破壞氨芐青霉素抗性基因，但不會破壞新霉素抗性基因，因此要篩選出成功導入重組質(zhì)粒的大腸桿菌，并準確定位所需大腸桿菌的菌落，實驗室至少需要兩種培養(yǎng)基，他們分別是含兩種抗生素的培養(yǎng)基和只含新霉素的培養(yǎng)基．
故答案為：
（1）漿細胞    病毒侵染并破壞巨噬細胞，影響抗原呈遞，阻斷了體液免疫的發(fā)生
（2）是
（3）①包裹蛋白基因 蛋白質(zhì)不具侵染性，不會破壞細胞結(jié)構(gòu)
②BglII、BamHI
③只含兩種抗生素的培養(yǎng)基和只含新霉素的培養(yǎng)基

點評 本題結(jié)合圖解，考查基因工程和細胞工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理、操作工具、操作步驟，掌握各步驟的相關(guān)細節(jié)；識記單克隆抗體的制備過程，能結(jié)合圖中和題中信息準確答題，綜合性較強，有一定難度．