【題目】乳酸菌指發(fā)酵糖類主要產(chǎn)物為乳酸的一類革蘭氏陽性細菌的總稱,經(jīng)革蘭氏染色后呈紫色。分離乳酸菌常用MRS固體培養(yǎng)基:蛋白胨5 g、牛肉膏5 g、酵母提取物2.5 g、檸檬酸二銨1 g、水500 mL、乙酸鈉2.5 gK2HPO41 g、MnSO4·4H2O0.125 g、瓊脂12.5 g、MgSO4·H2O0.29 g、CaCO35 g、葡萄糖10 g。請回答:

1)從MRS固體培養(yǎng)基成分可以看出乳酸菌喜________(填“葷”或“素”)。MRS培養(yǎng)基需要用高壓蒸汽滅菌法滅菌,滅菌時設(shè)置的壓力和時間分別為________g/cm2、__________min。

2)若用革蘭氏染色法對大腸桿菌進行染色,結(jié)果____(填“是”或“否”)呈紫色。

3)不僅可以制備固定化酶,還可以制備固定化細胞。用乳酸菌制作酸乳時,可對乳酸菌進行固定化處理,方法為:稱取適量海藻酸鈉配成水溶液,加入乳酸菌并攪拌均勻,以一定速度滴入CaCl2溶液中形成凝膠,使其凝固成珠狀。上述采用的固定方法是__________。

4)乳酸菌可用于泡菜制作。在對泡菜作亞硝酸鹽定量檢測時,若樣液測定時的比色杯光程小于制作標準曲線時的比色杯光程,則測得的樣液中亞硝酸鹽含量__________(填“偏大”“偏小”或“不影響”);若泡菜樣液測得的OD值過大,超出標準曲線,則最適宜的做法是__________。

【答案】 500 30 包埋法 偏小 對樣品溶液進行適當稀釋

【解析】

固定化酶和固定化細胞是利用物理或化學(xué)方法將酶或細胞固定在一定空間內(nèi)的技術(shù),包括包埋法、化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法。細胞個體大,難以被吸附或結(jié)合,多采用包埋法固定化。

測定亞硝酸鹽含量時的標準曲線制作方法:①取0、0.53.05.0 mL亞硝酸鈉標準溶液,分別放在25 mL容量瓶中,各加入4.5mL氯化銨緩沖液、2.5 mL60%乙酸溶液和5mL顯色劑,加水定容,混合均勻,暗處理25min;②用光程1 cm的比色杯在550 nm處分別測定光密度值(OD值);③以亞硝酸鈉質(zhì)量為橫坐標,以光密度為縱坐標,繪制標準曲線。

1)由MSR培養(yǎng)基成分中含有牛肉膏、蛋白胨等可知,乳酸菌喜葷。利用高壓蒸汽滅菌法對培養(yǎng)基滅菌時,設(shè)置的壓力和時間分別為500 g/cm2、30 min。

2)大腸桿菌是革蘭氏陰性細菌,用革蘭氏染色法對大腸桿菌進行染色,結(jié)果不會呈現(xiàn)紫色。

3)分析題文描述可知,對乳酸菌這類細胞進行固定化處理,采用的是包埋法。

4)在對泡菜制作過程中的亞硝酸鹽定量檢測時,若樣液測定時的比色杯光程小于制作標準曲線時的比色杯光程,則測得的樣液中亞硝酸鹽含量偏小。若泡菜樣液測得的OD值過大,超出標準曲線,則最適宜的做法是對樣品溶液進行適當稀釋后再次測定。

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