Question

【題目】天然釀酒酵母菌通常缺乏分解淀粉的酶類，用作發(fā)酵原料的淀粉需經(jīng)一系列復(fù)雜的轉(zhuǎn)化過程才能被利用．研究者從某絲狀真菌中獲取淀粉酶基因并轉(zhuǎn)入釀酒酵母菌，獲得的釀酒酵母工程菌可直接利用淀粉產(chǎn)生酒精．請回答下列問題：

（1）將淀粉酶基因切割下來所用的工具是 ，用 將淀粉酶基因與載體拼接成新的DNA分子，下一步將該DNA分子 ，以完成工程菌的構(gòu)建．

（2）若要鑒定淀粉酶基因是否插入釀酒酵母菌，可采用的檢測方法是 ；若要鑒定淀粉酶基因是否翻譯成淀粉酶，可采用 檢測．

（3）將該工程菌接種在含淀粉的固體平板培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一定時間后，加入碘液，工程菌周圍出現(xiàn)透明圈，請解釋該現(xiàn)象發(fā)生的原因．

（4）如何進(jìn)一步鑒定不同的轉(zhuǎn)基因工程菌菌株利用淀粉能力的大��？ ．

Answer 1

【答案】（1）限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶） DNA連接酶 導(dǎo)入釀酒酵母菌

（2）DNA分子雜交技術(shù) 抗原﹣抗體雜交或淀粉酶活性

（3）該工程菌產(chǎn)生的淀粉酶可分泌至培養(yǎng)基，水解淀粉后的區(qū)域，遇碘不再變藍(lán)色，產(chǎn)生透明圈

（4）測定相同培養(yǎng)條件下不同工程菌菌株的淀粉酶活性或酒精產(chǎn)量

【解析】

試題分析：1、基因工程操作的工具是限制性內(nèi)切酶、DNA連接酶和運(yùn)載體．

2、基因工程操作的步驟為提取目的基因、目的基因與運(yùn)載體結(jié)合、將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞、目的基因的檢測與表達(dá)．

3、目的基因的檢測有多種手段，如①DNA分子雜交技術(shù)；②分子雜交技術(shù)；③抗原﹣抗體雜交技術(shù)．

解：（1）將目的基因（淀粉酶基因）切割下來所用的工具是限制酶，將淀粉酶基因和運(yùn)載體連接起來需要DNA連接酶，之后將重組DNA分子導(dǎo)入受體細(xì)胞，以完成工程菌的構(gòu)建．

（2）檢測目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞，可采用DNA分子雜交技術(shù)；要鑒定目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)，可采用抗原抗體雜交技術(shù)；因?yàn)樵摴こ叹�產(chǎn)生的淀粉酶可分泌至培養(yǎng)基，水解淀粉后的區(qū)域，遇碘不再變藍(lán)色，產(chǎn)生透明圈．

（3）也可以通過檢測淀粉酶活性來檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)，即將該工程菌接種在含淀粉的固體平板培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一定時間后，加入碘液檢驗(yàn)，并檢驗(yàn)工程菌菌落周圍是否出現(xiàn)透明圈．

（4）測定相同培養(yǎng)條件下不同工程菌菌株的淀粉酶活性或酒精產(chǎn)量，可以鑒定不同的轉(zhuǎn)基因工程菌菌株利用淀粉能力的大�。�

故答案為：

（1）限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶） DNA連接酶 導(dǎo)入釀酒酵母菌

（2）DNA分子雜交技術(shù) 抗原﹣抗體雜交或淀粉酶活性

（3）該工程菌產(chǎn)生的淀粉酶可分泌至培養(yǎng)基，水解淀粉后的區(qū)域，遇碘不再變藍(lán)色，產(chǎn)生透明圈

（4）測定相同培養(yǎng)條件下不同工程菌菌株的淀粉酶活性或酒精產(chǎn)量