分析 DNA粗提取和鑒定的過程:
(1)實(shí)驗(yàn)材料的選取:凡是含有DNA的生物材料都可以考慮,但是使用DNA含量相對較高的生物組織,成功的可能性更大.
(2)破碎細(xì)胞,獲取含DNA的濾液:
動物細(xì)胞的破碎比較容易,以雞血細(xì)胞為例,在雞血細(xì)胞液中加入一定量的蒸餾水,同時(shí)用玻璃棒攪拌,過濾后收集濾液即可.如果實(shí)驗(yàn)材料是植物細(xì)胞,需要先用洗滌劑溶解細(xì)胞膜.例如,提取洋蔥的DNA時(shí),在切碎的洋蔥中加入一定的洗滌劑和食鹽,進(jìn)行充分的攪拌和研磨,過濾后收集研磨液.
(3)去除濾液中的雜質(zhì):
方案一的原理是DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同;
方案二的原理是蛋白酶分解蛋白質(zhì),不分解DNA;
方案三的原理是蛋白質(zhì)和DNA的變性溫度不同.
(4)DNA的析出與鑒定
①將處理后的溶液過濾,加入與濾液體積相等、冷卻的酒精溶液,靜置2~3min,溶液中會出現(xiàn)白色絲狀物,這就是粗提取的DNA.用玻璃棒沿一個方向攪拌,卷起絲狀物,并用濾紙吸取上面的水分.
②取兩支20ml的試管,各加入物質(zhì)的量濃度為2mol/L的NaCl溶液5ml,將絲狀物放入其中一支試管中,用玻璃棒攪拌,使絲狀物溶解.然后,向兩支試管中各加入4ml的二苯胺試劑.混合均勻后,將試管置于沸水中加熱5min,待試管冷卻后,比較兩支試管溶液顏色的變化,看看溶解有DNA的溶液是否變藍(lán).
解答 解:(1)由以上分析可知,圖中表示正確的實(shí)驗(yàn)操作順序是③→②→⑤→④→①.
(2)步驟③中加入蒸餾水的目的是加速血細(xì)胞的破裂;當(dāng)NaCl溶液濃度大于0.14mol/L時(shí),DNA在NaCl溶液中的溶解度隨NaCl溶液濃度的降低而減小,因此步驟⑤中加入蒸餾水后DNA析出.
(3)步驟①中所用酒精最佳是經(jīng)過充分預(yù)冷后再使用,該步驟的目的是利用DNA不溶于酒精的性質(zhì),可除去細(xì)胞中溶于酒精的物質(zhì)而得到較純的DNA.
(4)DNA可用二苯胺試劑鑒定,沸水浴后的顏色反應(yīng)為藍(lán)色.
(5)人是哺乳動物,哺乳動物血液中的紅細(xì)胞沒有細(xì)胞核和細(xì)胞器,因此用人血代替雞血來進(jìn)行該實(shí)驗(yàn)難以取得成功.
故答案為:
(1)③→②→⑤→④→①
(2)加速血細(xì)胞的破裂 DNA在NaCl溶液中的溶解度,隨NaCl溶液濃度的降低而減小
(3)充分預(yù)冷 提取含雜質(zhì)較少(或較純凈)的DNA(利用DNA不溶于酒精的性質(zhì),可除去細(xì)胞中溶于酒精的物質(zhì)而得到較純的DNA)
(4)二苯胺 藍(lán)色
(5)人血含DNA太少(成熟的紅細(xì)胞沒有細(xì)胞核)
點(diǎn)評 本題結(jié)合圖解,考查DNA的粗提取和鑒定,要求考生識記DNA粗提取和鑒定的原理、操作步驟、實(shí)驗(yàn)中采用的試劑及試劑的作用等,再結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題.
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科目:高中生物 來源:2015-2016學(xué)年浙江省高二國際班上期末生物試卷(解析版) 題型:選擇題
(2015秋•紹興校級期末)將兩種海綿動物的細(xì)胞分散成單個后混合培養(yǎng),發(fā)現(xiàn)糖蛋白相同的細(xì)胞能夠結(jié)合在一起,而糖蛋白成分不相同的細(xì)胞不能結(jié)合在一起.這一實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象說明細(xì)胞膜上糖蛋白與( )
A.細(xì)胞間的相互識別有關(guān) B.細(xì)胞間的免疫作用有關(guān)
C.細(xì)胞的分泌作用有關(guān) D.細(xì)胞間物質(zhì)交換有關(guān)
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科目:高中生物 來源: 題型:選擇題
A. | 用雞血作為材料,原因是雞血紅細(xì)胞有細(xì)胞核,其他動物紅細(xì)胞沒有細(xì)胞核 | |
B. | 用不同濃度的NaCl溶液進(jìn)行DNA粗提取,原因是DNA在其中溶解度不同 | |
C. | 用酒精進(jìn)行提純,原因是DNA溶于酒精,蛋白質(zhì)不溶于酒精 | |
D. | 用二苯胺試劑進(jìn)行鑒定,原因是DNA溶液中加入二苯胺試劑即呈藍(lán)色 |
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科目:高中生物 來源: 題型:選擇題
A. | ①③⑤ | B. | ③④ | C. | ②④ | D. | ②③④ |
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科目:高中生物 來源: 題型:多選題
A. | DNA在95%冷酒精和0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度都較低 | |
B. | 兔的紅細(xì)胞是提取DNA的理想材料 | |
C. | 脫氧核苷酸和氨基酸是構(gòu)成細(xì)菌質(zhì)粒的基本單位 | |
D. | 雙鏈DNA分子中,互補(bǔ)堿基之和所占比例在任意一條鏈及整個DNA分子中都相等 |
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科目:高中生物 來源: 題型:選擇題
A. | A→B→C | B. | B→A→C | C. | B→C→A | D. | C→B→A |
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科目:高中生物 來源: 題型:選擇題
A. | 色盲患者男性多于女性 | |
B. | 人類色盲基因b在X染色體上,Y染色體上既沒有色盲基因b,也沒有它的等位基因B | |
C. | 若女孩是色盲基因攜帶者,則該色盲基因是由父方遺傳來的 | |
D. | 男性色盲不傳兒子,只傳女兒,但女兒可以不顯色盲,卻會生下患色盲的外孫,代與代之間出現(xiàn)了明顯的不連續(xù)現(xiàn)象 |
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科目:高中生物 來源: 題型:解答題
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