Question

7．運(yùn)用所學(xué)知識(shí)回答下列問(wèn)題：
將蘇云金桿菌Bt蛋白的基因?qū)�入棉花�?xì)胞中，可獲得抗棉鈴蟲(chóng)的轉(zhuǎn)基因棉，其過(guò)程如如圖所示（注：農(nóng)桿菌中Ti質(zhì)粒上只有T-DNA片段能轉(zhuǎn)移到植物細(xì)胞中）．

（1）過(guò)程①需用同種限制性核酸內(nèi)切酶對(duì)含Bt基因的DNA和Ti質(zhì)粒進(jìn)行酶切．為將過(guò)程②獲得的含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌篩選出來(lái)，應(yīng)使用選擇培養(yǎng)基．
（2）過(guò)程③中將棉花細(xì)胞與農(nóng)桿菌混合后共同培養(yǎng)，旨在讓T-DNA進(jìn)入棉花細(xì)胞；除盡農(nóng)桿菌后，還須轉(zhuǎn)接到含卡那霉素的培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)，目的是篩選獲得T-DNA片段的植物細(xì)胞．
（3）檢驗(yàn)轉(zhuǎn)基因棉的抗蟲(chóng)性狀，常用方法是投放棉鈴蟲(chóng)．種植轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉能減
少農(nóng)藥的使用，以減輕環(huán)境污染．
（4）已知IgG抗體能消除狂犬病病毒．特異性IgG抗體獲取也可用單克隆抗體制備法，下面是單克隆抗體的制備過(guò)程示意圖，請(qǐng)回答下列問(wèn)題．

①?gòu)男∈蟮钠⑴K中取得B淋巴細(xì)胞之前，給小鼠注射的物質(zhì)A是狂犬病病毒（抗原）．
②動(dòng)物細(xì)胞融合除了采用植物原生質(zhì)體融合常用的誘導(dǎo)方法外，還可以采用滅活的病毒．
③B過(guò)程的目的是篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞．
④單克隆抗體與常規(guī)的血清抗體相比，最大的優(yōu)越性是特異性強(qiáng)，靈敏度高，可大量制備．

Answer 1

分析 分析題圖：圖示為轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉的培育過(guò)程圖，主要包括：①基因表達(dá)載體的構(gòu)建；②將目的基因?qū)�入農(nóng)桿菌中（采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法）；③表示通過(guò)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞，并誘導(dǎo)受體細(xì)胞脫分化形成愈傷組織；④⑤再分化，將離體棉花植株培育成抗蟲(chóng)棉還需采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)．

解答 解：（1）過(guò)程①表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建，為了獲得相同的黏性末端，需用同種限制性核酸內(nèi)切酶對(duì)含Bt基因的DNA和Ti質(zhì)粒進(jìn)行酶切．為將過(guò)程②獲得的含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌篩選出來(lái)，應(yīng)使用選擇培養(yǎng)基．
（2）過(guò)程③中將棉花細(xì)胞與農(nóng)桿菌混合后共同培養(yǎng)，旨在讓T-DNA進(jìn)入棉花細(xì)胞；除盡農(nóng)桿菌后，還須轉(zhuǎn)接到含卡那霉素的培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)，篩選獲得T-DNA片段的植物細(xì)胞．
（3）檢驗(yàn)轉(zhuǎn)基因棉的抗蟲(chóng)性狀，常用個(gè)體水平進(jìn)行鑒定，即投放棉鈴蟲(chóng)．種植轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉能減
少農(nóng)藥的使用，以減輕環(huán)境污染．
（4）①制備單克隆抗體需要獲得已免疫的B淋巴細(xì)胞，因此需要給小鼠注射狂犬病病毒（抗原）．
②植物原生質(zhì)體融合的方法包括物理法和化學(xué)法，動(dòng)物細(xì)胞融合除了這兩種誘導(dǎo)方法外，還可以采用滅活的病毒．
③B過(guò)程的目的是篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞．
④單克隆抗體與常規(guī)的血清抗體相比，最大的優(yōu)越性是特異性強(qiáng)，靈敏度高，可大量制備．
故答案為：
（1）限制性核酸內(nèi)切酶   選擇      
（2）T-DNA       篩選獲得T-DNA片段的植物細(xì)胞
（3）投放棉鈴蟲(chóng)    農(nóng)藥
（4）①狂犬病病毒（抗原）   ②滅活的病毒   ③篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞
④特異性強(qiáng)，靈敏度高，可大量制備

點(diǎn)評(píng) 本題考查基因工程、單克隆抗體制備的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的概念、原理、操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)，識(shí)記單克隆抗體制備的過(guò)程和優(yōu)點(diǎn)等，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．