Question

【題目】為調(diào)查某地土質(zhì)狀況，科研小組對(duì)該地土壤中分解尿素的細(xì)菌進(jìn)行了分離和純化培養(yǎng)。請(qǐng)回答下列問題。

（1）土壤中的尿素不能直接被農(nóng)作物吸收，只有當(dāng)土壤中的細(xì)菌將尿素分解成____后，才能被植物利用。

（2）為篩選出分解尿素的細(xì)菌，應(yīng)配制____的培養(yǎng)基以達(dá)到選擇的作用。分解尿素的細(xì)菌不能以CO2作為碳源，但可用葡萄糖作為碳源，由此推測(cè)分解尿素的細(xì)菌是 ___（填“自養(yǎng)”或“異養(yǎng)”）型生物。配制好的培養(yǎng)基需經(jīng)過高壓蒸汽滅菌，在裝入待滅菌物品時(shí)，不要擺得太擠，以免____。

（3）對(duì)不同深度土壤取樣統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目時(shí)，一般采用____方法接種，接種后需每隔24h統(tǒng)計(jì)一次菌落數(shù)目，選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的記錄作為結(jié)果，這樣可以防止____。對(duì)分離得到的分解尿素的菌種作進(jìn)一步的鑒定，需加入____，如果pH____，指示劑將變紅，可以初步鑒定該細(xì)菌能夠分解尿素。

Answer 1

【答案】氨（或NH3） 以尿素為唯一氮源 異養(yǎng) 妨礙蒸汽流通 稀釋涂布平板法 因培養(yǎng)時(shí)間不足而導(dǎo)致遺漏菌落的數(shù)目 酚紅指示劑 升高

【解析】

1、微生物常見的接種的方法：

（1）平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。

（2）稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

2、培養(yǎng)基選擇分解尿素的微生物的原理：培養(yǎng)基的氮源為尿素，以尿素作為氮源，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生長發(fā)育繁殖，所以用此培養(yǎng)基就能夠選擇出分解尿素的微生物。

（1）尿素是一種重要的農(nóng)家肥，但尿素不能直接被農(nóng)作物吸收，只有當(dāng)土壤中的細(xì)菌將尿素分解成氨后，才能被植物利用。

（2）為篩選出分解尿素的細(xì)菌，在配制培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)選擇以尿素作為唯一氮源。分解尿素的細(xì)菌不能以尿素的分解產(chǎn)物CO2作為碳源，但可用葡萄糖作為碳源，由此推測(cè)分解尿素的細(xì)菌是異養(yǎng)型生物。將裝有培養(yǎng)基的滅菌包裝入高壓蒸汽滅菌鍋時(shí)，注意不要裝得太擠，以免因影響蒸汽流通而影響滅菌的效果。

（3）需要對(duì)菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí)，需要采用的接種方法是稀釋涂布平板法。菌落的培養(yǎng)一般每隔24h統(tǒng)計(jì)一次，選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的記錄作為結(jié)果，這樣可以防止因培養(yǎng)時(shí)間不足而導(dǎo)致遺漏菌落的數(shù)目。在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，培養(yǎng)后，若pH升高，出現(xiàn)紅色就可以鑒定其中含有能夠分解尿素的細(xì)菌。