Question

3．2008年諾貝爾化學(xué)獎授予了三位在研究綠色熒光蛋白（GFP）方面作出突出貢獻的科學(xué)家．綠色熒光蛋白（GFP）能在藍(lán)光或紫外光下發(fā)出熒光，這樣借助GFP發(fā)出的熒光就可以跟蹤蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)部的移動情況，幫助推斷蛋白質(zhì)的功能．GFP基因可作為目的基因用于培育綠色熒光小鼠，如圖表示培育綠色熒光小鼠的基本流程：

請根據(jù)上述材料回答下列問題：
（1）圖中過程②常用的方法是顯微注射法；過程③利用的生物技術(shù)是早期胚胎培養(yǎng)；在進行過程④前，利用胚胎分割技術(shù)可以獲得數(shù)目更多且基因型相同的綠色熒光小鼠．
（2）用于培育綠色熒光小鼠的基因表達(dá)載體的組成必須有啟動子、終止子、目的基因、標(biāo)記基因等部分．
（3）cDNA屬于部分基因文庫，其構(gòu)建方法是：用某種生物發(fā)育的某個時期的mRNA通過逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生cDNA片段，與載體連接后儲存在一個受體菌群中．
（4）PCR是一項利用DNA復(fù)制的原理在生物體外復(fù)制特定DNA片段的核酸合成技術(shù)．其基本過程是：加熱至90～95℃使雙鏈DNA解鏈→冷卻至55～60℃使引物結(jié)合到互補DNA鏈→加熱至70～75℃使Taq聚合酶從引物起始進行互補鏈的合成，如此反復(fù)進行．

Answer 1

分析 1、根據(jù)題意和圖示分析可知：圖表示培育綠色熒光小鼠的基本流程，其中①表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程，②表示將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞，③表示早期胚胎培養(yǎng)，④表示胚胎移植，⑤表示個體發(fā)育．
2、PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)．原理：DNA復(fù)制；條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）；過程：高溫變性、低溫復(fù)性、中溫延伸．

解答 解：（1）過程②將基因表達(dá)載體導(dǎo)入小鼠受精卵時，采用最多也最有效的方法是顯微注射技術(shù)；過程③利用的生物技術(shù)是早期胚胎培養(yǎng)；在進行胚胎移植前，利用胚胎分割技術(shù)可以獲得數(shù)目更多且基因型相同的綠色熒光小鼠．
（2）基因表達(dá)載體的組成為目的基因+啟動子+終止子+標(biāo)記基因，所以用于培育綠色熒光小鼠的基因表達(dá)載體的組成必須有啟動子、終止子、目的基因和標(biāo)記基因等部分．
（3）cDNA屬于部分基因文庫，構(gòu)建方法是利用某種生物發(fā)育的某個時期的mRNA通過逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生cDNA片段，與載體連接后儲存在一個受體菌群中．
（4）PCR技術(shù)的基本過程是：高溫變性：加熱至90～95℃使雙鏈DNA解鏈；低溫復(fù)性：冷卻至55～60℃使DNA單鏈與引物結(jié)合；中溫延伸：加熱至70～75℃使Taq聚合酶從引物起始進行互補鏈的合成，如此反復(fù)進行．
故答案為：
（1）顯微注射法   早期胚胎培養(yǎng)  胚胎分割
（2）終止子  目的基因（GFP基因）   標(biāo)記基因
（3）部分   逆轉(zhuǎn)錄  載體
（4）雙鏈DNA解鏈     引物   Taq聚合酶

點評 本題結(jié)合我國首例綠色熒光蛋白（GFP）轉(zhuǎn)基因克隆鼠的培育過程示意圖，考查基因工程的原理及技術(shù)、PCR技術(shù)和胚胎工程技術(shù)，重點考查基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理、工具及操作過程，能準(zhǔn)確判斷圖中各步驟的名稱及采用的生物技術(shù)．