Question

13．牛奶中富含蛋白質(zhì)，長期飲用有助于增強體質(zhì)，但牛奶同時也是多種疾病的傳播載體．國家標(biāo)準(zhǔn)是每毫升牛奶中細菌數(shù)小于30000個．以下是牛奶消毒及細菌檢測實驗．

（1）圖1中步驟①稱為巴氏消毒法．中學(xué)實驗室對培養(yǎng)基進行滅菌的常用方法是高壓蒸汽滅菌．
（2）培養(yǎng)基中的蛋白胨可以為微生物提供水和碳源外，還應(yīng)提供氮源無機鹽等基本營養(yǎng)成分．進行步驟③操作時，應(yīng)選用圖2中的哪種工具進行涂布？B．為了避免雜菌污染，此步驟應(yīng)在酒精燈酒精燈火焰附近進行．
（3）某同學(xué)采用稀釋涂布平板法統(tǒng)計菌落數(shù)目，菌落分布如圖3所示，推測該同學(xué)可能的操作失誤是涂布不均勻．
（4）將接種后的培養(yǎng)基和作為對照的未接種同時放入37℃恒溫培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)36小時．取出后統(tǒng)計各平板的菌落數(shù)（如表），適于計數(shù)的平板菌落數(shù)一般需要在30-300之間，經(jīng)過消毒后的牛奶中，每毫升中細菌數(shù)大約是8500個．

牛奶稀釋倍數(shù)	10-2	10-3	10-4
平板1菌落數(shù)	87	10	1
平板2菌落數(shù)	83	12	1
平板3菌落數(shù)	85	10	0

Answer 1

分析 分析圖解：圖中①表示用巴士消毒法對牛奶進行消毒，步驟②表示對牛奶進行系列稀釋，步驟③表示利用稀釋涂布平板法對牛奶中細菌進行培養(yǎng)計數(shù)．

解答 解：（1）圖中步驟①利用80℃、15min對牛奶進行巴氏消毒．對培養(yǎng)基滅菌常用高壓蒸汽滅菌法．
（2）培養(yǎng)基的基本成分包括水、無機鹽、碳源和氮源，培養(yǎng)基中的蛋白胨可以為微生物提供碳源、水，因此還應(yīng)提供氮源和無機鹽等基本營養(yǎng)成分．進行步驟③操作時，應(yīng)選用涂布器，即圖B工具．為了避免雜菌污染，此步驟應(yīng)在酒精燈火焰附近進行．
（3）圖3中菌落集中在某一區(qū)域，其形成原因是涂布不均勻．
（4）將接種后的培養(yǎng)基和作為對照的一個未接種的培養(yǎng)基同時放入37℃恒溫培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)36小時．用稀釋涂布平板法測定同一樣品中的細菌數(shù)時，在每一個梯度濃度內(nèi)，至少要涂布3個平板，確定對照組無菌后，選擇菌落數(shù)在30～300的進行記數(shù)，求其平均值，取出后統(tǒng)計各平板的菌落數(shù)，因此根據(jù)表格數(shù)據(jù)，應(yīng)該選擇其中稀釋倍數(shù)為10^-2的平板進行計數(shù)，經(jīng)過消毒后的牛奶中，細菌數(shù)大約是=（87+83+85）÷3×10²=8500個/mL．
故答案為：
（1）巴氏     高壓蒸汽滅菌
（2）氮源、無機鹽     B    酒精燈火焰
（3）涂布不均勻
（4）未接種     30-300     8500

點評 本題考查了微生物培養(yǎng)過程中的無菌技術(shù)、分離微生物的方法，主要考查學(xué)生設(shè)計和完善實驗步驟，分析實驗結(jié)果獲取結(jié)論的能力和提出問題進行進一步探究的能力，利用所學(xué)的微生物知識解決生活問題的能力．