Question

18．關(guān)于科學(xué)探究問題
在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中發(fā)現(xiàn)一種廣泛使用的除草劑（含氮有機(jī)化合物）在土壤中不易降解，長期使用可污染土壤．為修復(fù)被該除草劑污染的土壤，需要選育能高效降解該除草劑的細(xì)菌．
請完成下列選育的實(shí)驗方案：
步驟一：菌種浸出液的制備：
（1）從使用過除草劑的土壤中獲取一定量的樣本，然后置于無菌水中，震蕩一定時間，備用．
步驟二：配置菌種選育培養(yǎng)基并滅菌：
所配制的培養(yǎng)基的特點(diǎn)是固體和含不同濃度除草劑．
步驟三：
（1）劃線接種
（2）在適宜的溫度等條件進(jìn)行倒置培養(yǎng)一定時間．
（3）觀察選取在較高濃度下除草劑的培養(yǎng)基中大菌落．
（2）常用的接種劃線工具是接種環(huán)．
某同學(xué)在純化菌株時，劃線接種后一段時間后，平板的第一劃線區(qū)域長滿致密的菌苔，第二劃線區(qū)域無菌落，造成劃線無菌落可能的操作失誤是接種環(huán)灼燒后未冷卻或接種劃線未從第一區(qū)域開始．

Answer 1

分析 從土壤中分離微生物的一般步驟是：土壤取樣、選擇培養(yǎng)、梯度稀釋、涂布培養(yǎng)和篩選菌株．從土壤中分離目的菌要用固體的選擇培養(yǎng)基；培養(yǎng)液中缺少大部分細(xì)菌可利用的氮源或有氧條件抑制了大部分細(xì)菌的生長；在固體培養(yǎng)基中，無透明帶菌落利用的氮源主要是氮?dú)�；有透明帶菌落利用的氮源主要是除草劑，�?jù)此可篩選出目的菌．

解答 解：（1）步驟一：由于該除草劑為含氮有機(jī)物，所以篩選能高效降解該除草劑的細(xì)菌，應(yīng)在使用過除草劑的土壤取樣，并使用含該除草劑為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基．
步驟二：所配制的培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基并需要配置含不同濃度除草劑的培養(yǎng)基．
步驟三：
   （2）接種后應(yīng)該進(jìn)行培養(yǎng)，即在適宜的溫度等條件進(jìn)行倒置培養(yǎng)一定時間．
   （3）觀察選取在較高濃度下除草劑的培養(yǎng)基中大菌落．
（2）平板劃線法的接種工具是接種環(huán)．根據(jù)題意分析，該同學(xué)的失誤是接種環(huán)灼燒后未冷卻組成菌種燙死，或接種劃線未從第一區(qū)域開始，即二次劃線起始時就沒有菌種．
故答案為：
（1）使用過除草劑的土壤     固體   含不同濃度除草劑
（2）在適宜的溫度等條件進(jìn)行倒置培養(yǎng)一定時間
觀察選取在較高濃度下除草劑的培養(yǎng)基中大菌落
（3）接種環(huán)      接種環(huán)灼燒后未冷卻或接種劃線未從第一區(qū)域開始

點(diǎn)評 微生物培養(yǎng)的實(shí)驗，是“生物知識內(nèi)容表”所列的生物實(shí)驗，包括理解實(shí)驗?zāi)康�、原理、方法和操作步驟，考生需掌握相關(guān)的操作技能，并能將這些實(shí)驗涉及的方法和技能進(jìn)行綜合運(yùn)用及實(shí)驗分析能力．