Question

2．土壤是“微生物的天然培養(yǎng)基”，下面是有關(guān)土壤中分解尿素的細(xì)菌分離和計數(shù)的實驗過程，請回答相關(guān)問題：
（1）土壤中的細(xì)菌之所以能分解尿素是因為它們能合成脲酶．
（2）為分離出土壤中分解尿素的細(xì)菌，應(yīng)該用尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基進(jìn)行分離，并加入酚紅指示劑進(jìn)行鑒別．
（3）若取土樣5g，應(yīng)加入45mL的無菌水配制成稀釋10倍土壤溶液．因土壤中細(xì)菌密度很大，需要不斷加以稀釋，配制成不同濃度的土壤溶液．取樣稀釋前，一定要搖勻以減少誤差．將10³-10⁷倍的稀釋液分別吸取0.1mL加入到固體培養(yǎng)基上，用涂布器將菌液鋪平．這種接種方法稱為稀釋涂布平板法．
（4）將接種的培養(yǎng)皿放置在37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h～48h，觀察并統(tǒng)計具有紅色環(huán)帶的菌落數(shù)，結(jié)果如下表，其中10⁵或10⁶倍的稀釋比較合適．

稀釋倍數(shù)	103	104	105	106	107
菌落數(shù)（個）	500	367	248	36	18

Answer 1

分析 閱讀題干可知，本題是考查土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計數(shù)的知識，實驗圖解如下：

根據(jù)問題涉及的具體內(nèi)容梳理相關(guān)知識點，然后分析解答．

解答 解：（1）土壤中的細(xì)菌之所以能分解尿素是因為它們能合成脲酶．
（2）尿素為唯一碳源的培養(yǎng)基上，只有能分解尿素的菌才能以尿素作為氮源生長繁殖，不能分解尿素的菌因缺乏氮源無法生長繁殖，因此分離出土壤中分解尿素的細(xì)菌，應(yīng)該用尿素為唯一碳源的培養(yǎng)基進(jìn)行分離，分解尿素的菌在分解尿素時產(chǎn)生氨氣，使酚紅指示劑顯紅色，所以要加入酚紅指示劑進(jìn)行鑒別．
（3）若取土樣5g，應(yīng)加入45ml的無菌水配制成稀釋10倍土壤溶液，樣品的稀釋程度直接影響平板上生長的菌落的數(shù)目，選用一定稀釋范圍的樣品進(jìn)行培養(yǎng)，取樣稀釋前，一定要將菌液搖勻以減少誤差；將10³-10⁷倍的稀釋液分別吸取0.1mL加入到固體培養(yǎng)基上，用稀釋涂布平板法將菌液用涂布器涂布到固體培養(yǎng)基上．
（4）將接種的培養(yǎng)皿放置在37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h～48h，觀察并統(tǒng)計具有紅色環(huán)帶的菌落既是分解尿素的菌的菌落，估算樣品中的活菌數(shù)時，往往選取菌落數(shù)在30到300之間的平板，分析表格是數(shù)據(jù)可知，10⁵和10⁶的稀釋度平板菌落數(shù)在這一范圍．
故答案為：
（1）脲酶   
（2）尿素為唯一氮源     酚紅     
（3）45
（4）搖勻（震蕩）   涂布器    稀釋涂布平板法  
（5）10⁵或10⁶

點評 本題是知識點是分解尿素的菌的代謝類型，分解尿素的菌的分離應(yīng)該選用的培養(yǎng)基，稀釋涂布平板法的操作過程，統(tǒng)計菌落數(shù)的平板要求，主要考查學(xué)生對分解尿素的菌的分離和計數(shù)的知識的掌握和運用．