Question

紅細胞是脊椎動物體內(nèi)通過血液運送氧氣的最主要的媒介，含有大量的血紅蛋白時，我們可以選用動物的血液來提取和分離血紅蛋白，請回答下列有關(guān)問題：
（1）提取和分離血紅蛋白時，首先對紅細胞進行洗滌以去除雜質(zhì)蛋白，洗滌時應(yīng)使用生理鹽水而不使用蒸餾水的原因是

 

．
（2）將洗滌好的紅細胞倒入燒杯中，加入

 

充分攪拌，紅細胞破裂，釋放出血紅蛋白．
（3）分離蛋白質(zhì)分子的一種常用方法是凝膠色譜法（如圖），是根據(jù)

 

分離蛋白質(zhì)的有效方法．
①a、b均為蛋白質(zhì)分子，其中先從層析柱中洗脫出來的是

 

，原因是

 

 

．
②裝填凝膠色譜柱時，色譜柱內(nèi)不能有氣泡存在，原因是

 

．
（4）血紅蛋白提取和分離的程序為

 

和純度鑒定．

Answer 1

考點：酶活力測定的一般原理和方法

專題：

分析：熟悉記憶血紅蛋白提取和鑒定實驗的原理，操作步驟．注意事項．

解答： 解：（1）生理鹽水保持紅細胞滲透壓的穩(wěn)定而不破碎在未洗凈血漿中雜質(zhì)蛋白前，紅細胞如果破裂了，就可能是血紅蛋白和雜質(zhì)蛋白混在一起，加大分離難度．  故答案為：防止紅細胞吸水破裂（2）加蒸餾水是讓細胞吸水膨脹破裂．細胞膜主要成分是磷脂，易溶于甲苯等有機溶劑，加入甲苯能加快紅細胞破碎并釋放出紅細胞．  故答案為：蒸餾水和甲苯
（3）凝膠色譜法，根據(jù)相對分子量大小分離物質(zhì)，分子量大的先分離出來，分子量小的之后分離出來．   故答案為：相對分子質(zhì)量大小
①相對分子質(zhì)量大的物質(zhì)，無法進入凝膠珠中的通道孔，只能留在凝膠珠之間的空隙中．   故答案為：a   a相對分子質(zhì)量大，無法進入凝膠內(nèi)部的通道，只能在凝膠外部移動，路程較短，移速較快②裝填凝膠色譜柱時，色譜柱內(nèi)不能有氣泡存在，因為氣泡會擾亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序，降低分離效果．   故答案為氣泡會擾亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序，降低分離效果．（4）血紅蛋白提取和分離的程序為：樣品處理（紅細胞洗滌、血紅蛋白的釋放）、粗分離（分離血紅蛋白溶液、透析）、純化和純度鑒定．  故答案為：樣品處理、粗分離、純化

點評：本題考查了血紅蛋白的提取和分離實驗．意在考查考生能理解所學知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力；