Question

科學(xué)家在一種果蠅的cDNA文庫(kù)中，篩選到1個(gè)可能與細(xì)胞周期調(diào)控有關(guān)的基因，該基因控制合成Ecp蛋白．為了進(jìn)一步研究Ecp蛋白的功能，需要制備抗果蠅Ecp蛋白單克隆抗體（mAb）．方法如下：
（1）制備Ecp純凈蛋白，將其作為

 

物質(zhì)，注射到小鼠體內(nèi)，多次注射以加強(qiáng)免疫效果．一段時(shí)間后，從小鼠脾臟中取已免疫的

 

細(xì)胞，在化學(xué)誘導(dǎo)劑

 

介導(dǎo)下，與鼠的

 

細(xì)胞進(jìn)行融合，再用特定的

 

進(jìn)行篩選，以獲榑雜交瘤細(xì)胞，該細(xì)胞的特點(diǎn)是

 

．
（2）體外培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞除需要適宜的營(yíng)養(yǎng)條件外，還需要

 

的環(huán)境、適宜的溫度、pH及

 

．
（3）-段時(shí)間后從細(xì)胞培養(yǎng)液中就可以大量提取mAb了，該mAb能與

 

發(fā)生特異性結(jié)合．

Answer 1

考點(diǎn)：單克隆抗體的制備過程,動(dòng)物細(xì)胞與組織培養(yǎng)過程

專題：

分析：單克隆抗體的制備：
1、細(xì)胞來(lái)源：B淋巴細(xì)胞：能產(chǎn)生特異性抗體，在體外不能無(wú)限繁殖；骨髓瘤細(xì)胞：不產(chǎn)生專一性抗體，體外能無(wú)限繁殖．
2、雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)：既能大量增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體．
3、兩次次篩選：①篩選得到雜交瘤細(xì)胞（去掉未雜交細(xì)胞以及自身融合的細(xì)胞）；②篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群．
4、兩次抗體檢測(cè)：專一抗體檢驗(yàn)陽(yáng)性．
5、提取單克隆抗體：從培養(yǎng)液或小鼠腹水中提取．
6、單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)：特異性強(qiáng)、靈敏度高，并可能大量制備．

解答： 解：（1）制備Ecp純凈蛋白，將其作為抗原注射到小鼠體內(nèi)，一段時(shí)間后，從小鼠脾臟中取已免疫的B淋巴細(xì)胞，在化學(xué)誘導(dǎo)劑聚乙二醇介導(dǎo)下，與鼠的骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合，再用特定的選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，以獲榑雜交瘤細(xì)胞，該細(xì)胞的特點(diǎn)是既能迅速大量繁殖又能產(chǎn)生專一抗體．
（2）體外培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞除需要適宜的營(yíng)養(yǎng)條件外，還需要無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境、適宜的溫度、pH及氣體環(huán)境．
（3）抗果蠅Ecp蛋白單克隆抗體（mAb）能與Ecp蛋白發(fā)生特異性結(jié)合．
故答案為：
（1）抗原        B淋巴細(xì)胞      聚乙二醇         骨髓瘤     選擇性培養(yǎng)基    既能迅速大量繁殖又能產(chǎn)生專一抗體
（2）無(wú)菌、無(wú)毒     氣體環(huán)境          
（3）Ecp蛋白

點(diǎn)評(píng)：本題考查了單克隆抗體的制備過程，需要考生掌握制備過程中所需要的試劑及其作用，制備過程中的條件等具體內(nèi)容，難度中等．