Question

回答有關(guān)微生物的問題
急性腸胃炎、手足口病分別是由細(xì)菌、病毒通過消化道進(jìn)入人體導(dǎo)致的，故檢驗飲用水的細(xì)菌含量和病毒含量是有效監(jiān)控疾病發(fā)生的必要措施．
（1）檢驗大腸桿菌的含量時，通常將水樣進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的水樣用涂布器分別涂布到培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng)，記錄菌落數(shù)量，這種接種方法稱為

 

．下面4種菌落分布圖中，不可能用該方法得到的是

 

．

（2）用該方法統(tǒng)計樣本菌落數(shù)時是否需要設(shè)置對照組？

 

．原因是

 

．
（3）如分別取0.1mL已稀釋10³倍的水樣分別涂布到3個培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)基記錄到大腸桿菌的菌落數(shù)分別為55、56、57，則每升原水樣中大腸桿菌數(shù)為

 

．
（4）已知大腸桿菌能發(fā)酵乳糖并產(chǎn)氣．現(xiàn)提供足量的已滅菌的乳糖蛋白胨培養(yǎng)液和具塞試管，應(yīng)如何判斷待檢水樣中是否含有大腸桿菌？

 

．
（5）為進(jìn)一步分離大腸桿菌，需將檢測出大腸桿菌的發(fā)酵管轉(zhuǎn)種在加入

 

的培養(yǎng)基中，培養(yǎng)一段時間，大腸桿菌菌落可呈現(xiàn)出

 

．
（6）手足口病的病原體是柯薩奇病毒．如需檢測水樣中是否有柯薩奇病毒，可以通過檢測柯薩奇病毒特有的DNA片段來實現(xiàn)．基于水樣中病毒DNA極少，故可通過

 

技術(shù)（全稱）增加病毒DNA片段，然后進(jìn)行檢測．

Answer 1

考點：測定某種微生物的數(shù)量

專題：

分析：閱讀題干可知，本題是以檢驗飲用水的細(xì)菌含量和病毒含量為材料考查微生物的培養(yǎng)技術(shù)，根據(jù)問題涉及的具體內(nèi)容回憶相關(guān)知識點分析綜合進(jìn)行解答．

解答： 解析：（1）此方法屬于菌落計數(shù)法中的稀釋涂布平板法；分析題圖A、B、C、D四個平板，前三個平板是采用的稀釋涂布平板法，D是用平板劃線法接種的．
（2）為了準(zhǔn)確計數(shù)需設(shè)置對照組，以便確定培養(yǎng)基是否被雜菌污染，若被污染，則計數(shù)結(jié)果明顯比實際多． 
（3）三個菌落的平均數(shù)=（55+56+57）/3=56，則每毫升樣品中菌株數(shù)=56/0.1×10³=5.6×10⁵個，所以每升原水樣中的菌株數(shù)=5.6×10⁵×10³=5.6×10⁸個．
（4）由于大腸桿菌發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣，所以若觀察到有氣泡生成，則說明水樣中有大腸桿菌．
（5）進(jìn)一步分離和檢測大腸桿菌，可以把發(fā)酵管中大腸桿菌接種在加入伊紅美藍(lán)的固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)，大腸桿菌在加入伊紅美藍(lán)的固體培養(yǎng)基上生長形成有金屬光澤的紫黑色菌落．
（6）體外對DNA片段進(jìn)行擴(kuò)增的方法是多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增DNA片段技術(shù)（PCR技術(shù)）
故答案應(yīng)為：
（1）（稀釋）涂布平板法    　D
（2）需要設(shè)置（對照組）　     因為需要判定培養(yǎng)基是否被雜菌污染
（3）5.6×10⁸個
（4）通過無菌操作向試管內(nèi)注入一定量待檢水樣，再注入已滅菌的乳糖蛋白胨培養(yǎng)液將試管充滿，塞上塞子，混勻后置于37恒溫箱培養(yǎng)24 h．若試管內(nèi)有氣泡生成說明水樣中有大腸桿菌．
（5）伊紅美藍(lán)和瓊脂   有金屬光澤的紫黑色
（6）多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增DNA片段

點評：本題的知識點是微生物培養(yǎng)常用的接種方法，對樣品中微生物數(shù)量的測定，檢測微生物的方法，主要考查學(xué)生運用微生物的培養(yǎng)技術(shù)解決生活中問題的能力和對微生物 是實驗室培養(yǎng)技術(shù)的綜合應(yīng)用能力．