Question

14．如圖是利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)生產(chǎn)干擾素的簡(jiǎn)化流程．請(qǐng)分析回答：

（1）過程①使用的（同一種）限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）酶能使特定部位的兩個(gè)脫氧核苷酸之間的磷酸二酯鍵（化學(xué)鍵）斷開．運(yùn)載體的黏性末端與目的基因DNA片段的黏性末端就可通過堿基互補(bǔ)原則     而結(jié)合． 過程②需要用到DNA連接酶酶，
（2圖中A的名稱是重組載體（重組質(zhì)粒），它重組成功的物質(zhì)基礎(chǔ)是干擾素基因的DNA與細(xì)菌質(zhì)粒DNA的結(jié)構(gòu)組成相同．
（3）A上應(yīng)有RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，以驅(qū)動(dòng)干擾素基因轉(zhuǎn)錄，該部位稱為啟動(dòng)子．為直接檢測(cè)干擾素基因是否轉(zhuǎn)錄，可從細(xì)胞中提取RNA與用放射性同位素標(biāo)記的目的基因作探針進(jìn)行分子雜交，．
（4）利用PCR擴(kuò)增儀大量擴(kuò)增目的基因的前提是目的基因的核苷酸序列要一段是已知的，以便根據(jù)這一序列合成DNA聚合酶（Taq酶），除了該物質(zhì)和目的基因外，擴(kuò)增儀中還需加入四種脫氧核苷酸和引物酶，并適時(shí)調(diào)整溫度，才能使目的基因數(shù)量成指數(shù)式增長(zhǎng)．
（5）在該工程中所用的基因“剪刀”能識(shí)別的序列和切點(diǎn)是-G′GATCC-．請(qǐng)畫出質(zhì)粒被切割形成黏性末端的過程圖

Answer 1

分析 基因工程的基本操作程序
第一步：目的基因的獲取
第二步：基因表達(dá)載體的構(gòu)建
第三步：將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞
第四步：目的基因的檢測(cè)和表達(dá)

解答 解：（1）切割目的基因和質(zhì)粒需用同一種限制性核酸內(nèi)切酶．限制酶破壞脫氧核苷酸之間的磷酸二酯鍵，目的基因與質(zhì)粒的黏性末端之間通過堿基互補(bǔ)配對(duì)連接起來，通過DNA連接酶構(gòu)建重組質(zhì)粒．
（2）由于干擾素基因的DNA與細(xì)菌質(zhì)粒DNA結(jié)構(gòu)組成相同，所以可構(gòu)建重組質(zhì)粒．
（3）驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄的結(jié)構(gòu)是啟動(dòng)子．檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄，可從細(xì)胞中提取RNA與用放射性同位素標(biāo)記的目的基因作探針進(jìn)行分子雜交．
（4）PCR的條件需有引物和耐高溫的DNA聚合酶，即Taq酶．
（5）黏性末端是兩條鏈，如圖：
-G′GATCC--G GATCC-
-C CTAGG--CCTAG G-
 故答案為：
（1）（同一種）限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）  磷酸二酯鍵   堿基互補(bǔ)原則  DNA連接酶
（2）重組載體（重組質(zhì)粒） 干擾素基因的DNA與細(xì)菌質(zhì)粒DNA
（3）啟動(dòng)子   RNA   目的基因
（4）引物    DNA聚合酶（Taq酶）
（5）-G′GATCC--G GATCC-
-C CTAGG--CCTAG G-

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合利用利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)生產(chǎn)干擾素的簡(jiǎn)化流程，考查基因工程的技術(shù)及原理及應(yīng)用，要求考生識(shí)記基因工程的原理及技術(shù)，能準(zhǔn)確判斷圖中各過程的名稱，能運(yùn)用所學(xué)的知識(shí)結(jié)合圖中信息準(zhǔn)確判斷各題．