Question

18．新鮮的泡菜濾液中含有乳酸菌，可作為實驗材料分離純化乳酸菌．請回答下列問題：
（1）分離純化乳酸菌時，首先需要用無菌水對泡菜濾液進行梯度稀釋，這樣做的理由是在稀釋度足夠高的菌落里，聚集在一起的乳酸菌將被分散成單個細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落．
（2）分離純化所用固體培養(yǎng)基中因含有碳酸鈣而不透明，乳酸菌產(chǎn)生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣，從而使培養(yǎng)基在分離純化過程中會形成透明圈．
（3）若要長期保存乳酸菌，菌液中常需要加入一定量的甘油（填“蒸餾水”“甘油”或“碳酸鈣”），且要放置在-20（填“-5”“-20”或“-100”）℃的冷凍箱中，若要短期保存乳酸菌，可將菌種接種到試管的固體斜面培養(yǎng)基上（填“溶液中”“固體培養(yǎng)基表面上”或“固體斜面培養(yǎng)基上”），菌落長成后，將試管放置在4（填“-4”“0”或“4”）℃的冰箱中保藏．

Answer 1

分析 泡菜發(fā)酵的實驗原理：
（1）乳酸菌在無氧條件下，將糖分解為乳酸．
（2）利用乳酸菌制作泡菜的過程中會引起亞硝酸鹽的含量的變化．
溫度過高，食鹽用量不足10%、腌制時間過短，容易造成細(xì)菌大量繁殖，亞硝酸鹽含量增加．一般在腌制10天后，亞硝酸鹽的含量開始下降．
（3）測定亞硝酸鹽含量的原理：在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)后，與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料，與已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)顯色液目測比較，估算泡菜中亞硝酸鹽含量．

解答 解：（1）在稀釋度足夠高的菌落里，聚集在一起的乳酸菌將被分散成單個細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落．因此分離純化乳酸菌時，首先需要用無菌水對泡菜濾液進行梯度稀釋．
（2）分離純化所用固體培養(yǎng)基中因含有碳酸鈣而不透明，乳酸菌產(chǎn)生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣，從而使培養(yǎng)基在分離純化過程中會形成透明圈．
（3）若要長期保存乳酸菌，菌液中常需要加入一定量的甘油，且要放置在-20℃的冷凍箱中，若要短期保存乳酸菌，可將菌種接種到試管的固體斜面培養(yǎng)基上，菌落長成后，將試管放置在4℃的冰箱中保藏．
故答案為：
（1）梯度稀釋      在稀釋度足夠高的菌落里，聚集在一起的乳酸菌將被分散成單個細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落
（2）透明圈
（3）甘油-20        固體斜面培養(yǎng)基上        4

點評 本題考查泡菜制作的相關(guān)知識，對于此類試題，需要考生注意的細(xì)節(jié)較多，如實驗的原理、實驗選用的材料、實驗采用的試劑及試劑的作用、實驗現(xiàn)象等，需要考生在平時的學(xué)習(xí)過程中注意積累．