【題目】【加試題】為了研究接種量對酵母菌種群數(shù)量的影響。請根據(jù)以下提供的實驗材料,以酵母菌活細胞數(shù)及細胞總數(shù)(活細胞數(shù)和死細胞數(shù)之和)為檢測指標,完善實驗思路,預(yù)測實驗結(jié)果并進行分析與討論。

材料與用具:培養(yǎng)瓶、酵母菌液、美藍染料(氧化型為藍色,還原型為無色;使用的美藍為氧化型,且能進入細胞)、液體培養(yǎng)基、高壓蒸汽滅菌鍋、移液器、搖床、血細胞計數(shù)板、吸管、顯微鏡等。

(要求與說明:定時取樣,培養(yǎng)足夠時間;細胞計數(shù)的具體操作過程不作要求;培養(yǎng)過程中不更換培養(yǎng)液;實驗條件適宜)

請回答:

(1)完善實驗思路:

①對液體培養(yǎng)基用___________________進行滅菌后,然后均分到3組培養(yǎng)瓶中。用移液器吸取____________________的酵母菌液,分別接種入3組培養(yǎng)瓶。

②從各組培養(yǎng)瓶各吸取0.1mL酵母菌培養(yǎng)液,___________________,室溫染色適宜時間。立即在顯微鏡下用血細胞計數(shù)板計數(shù)__________細胞和__________細胞,統(tǒng)計細胞總數(shù),并記錄。

③將3組培養(yǎng)瓶放在搖床上恒溫培養(yǎng)。

……

__________

(2)預(yù)期實驗結(jié)果(設(shè)計一個坐標系,并繪制不同接種量下酵母菌活細胞數(shù)的變化曲線):_____________。

(3)分析與討論:

①美藍染色后活的酵母細胞從藍色變?yōu)闊o色的原因是_____________。

②在整個實驗過程中,直接從靜置的培養(yǎng)瓶中取培養(yǎng)原液計數(shù)的做法是錯誤的,請糾正錯誤______________________________________________________。

【答案】 高壓蒸汽滅菌鍋 3種不同接種量 加入美藍染料適量,搖勻 無色酵母活 藍色酵母死 每隔相同時間重復(fù)②。⑤統(tǒng)計分析實驗所得數(shù)據(jù)。(1分)

活酵母菌細胞呼吸產(chǎn)生還原態(tài)氫,能使美藍從藍色的氧化型變?yōu)闊o色的還原型 搖勻培養(yǎng)液后再取樣,培養(yǎng)后期的樣液稀釋后再計數(shù)

【解析】試題分析:本實驗?zāi)康氖茄芯拷臃N量對酵母菌種群數(shù)量的影響,自變量是培養(yǎng)時間,因變量是酵母菌活細胞數(shù)及細胞總數(shù)。結(jié)合所給材料和用具以及具體要求,完善實驗思路:

(1)①用高壓蒸汽滅菌鍋對液體培養(yǎng)基進行滅菌后,然后均分到3組培養(yǎng)瓶中。用移液器吸取3種不同接種量的酵母菌液,分別接種入3組培養(yǎng)瓶。

②從各組培養(yǎng)瓶各吸取0.1mL酵母菌培養(yǎng)液,加入美藍染料適量,搖勻,室溫染色適宜時間。立即在顯微鏡下用血細胞計數(shù)板計數(shù)無色酵母活細胞和藍色酵母死細胞,統(tǒng)計細胞總數(shù),并記錄。

③將3組培養(yǎng)瓶放在搖床上恒溫培養(yǎng)。

每隔相同時間重復(fù)步驟

統(tǒng)計分析實驗所得數(shù)據(jù)。

(2)設(shè)計一個坐標系并繪制不同接種量下酵母菌活細胞數(shù)的變化曲線時應(yīng)注意:①橫縱坐標的含義和單位;②必須繪制出三條曲線(代表不同接種量)且每條曲線要繪制出大致的變化趨勢;③要對三條曲線作出明確的示例標注。

(3)①實驗中美藍染色后活的酵母細胞從藍色變?yōu)闊o色的原因是活酵母菌細胞呼吸產(chǎn)生還原態(tài)氫,能使美藍從藍色的氧化型變?yōu)闊o色的還原型。

若在實驗過程中直接從靜置的培養(yǎng)瓶中取培養(yǎng)原液計數(shù),會導(dǎo)致培養(yǎng)液中酵母菌分布不均勻,使計數(shù)結(jié)果不準確,正確的做法是搖勻培養(yǎng)液后再取樣,培養(yǎng)后期的樣液稀釋后再計數(shù)

練習(xí)冊系列答案
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(2)測定亞硝酸鹽含量:取10mL樣品溶液,進行顯色處理。用光程為1cm_________550nm處測定光密度值。

(3)甘藍泡菜發(fā)酵過程中NR活性和亞硝酸鹽含量均呈______________的趨勢。添加不同濃度的GSH處理均可_________NR活性和亞硝酸鹽含量的峰值。當添加GSH的質(zhì)量分數(shù)較低時,NR活性和亞硝酸鹽含量隨著GSH濃度的增大而_________。

(二)現(xiàn)采用建立轉(zhuǎn)基因小鼠的方法來研究CA65基因的作用,請回答有關(guān)的問題:

(1)CA65轉(zhuǎn)基因小鼠載體的構(gòu)建:將CA65基因用______________酶切后,插入到角蛋白基因中,構(gòu)建CA65轉(zhuǎn)基因載體。

(2)CA65轉(zhuǎn)基因小鼠的獲得與檢測:用____________法將轉(zhuǎn)基因載體注射到小鼠的__________中,體外培養(yǎng)獲得早期胚胎再__________到代孕母鼠子宮角或____________中。小鼠出生10天后提取其DNA,用__________技術(shù)擴增CA65基因來檢測CA65轉(zhuǎn)基因小鼠。

(3)轉(zhuǎn)基因組與野生對照組相比,CA65轉(zhuǎn)基因小鼠的淋巴管明顯增多,管徑變粗。該實驗結(jié)果說明CA65可以____________________。

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