Question

20．生物乙醇是以生物質(zhì)為原料生產(chǎn)的可再生能源．我國利用農(nóng)作物廢棄物（秸稈）生產(chǎn)乙醇，其技術流程為纖維素酶分解-→酵母菌發(fā)酵-→蒸餾-→成品．纖維素酶可以從能分解纖維素的細菌培養(yǎng)液中提�。�某同學設計了從土壤中分離纖維素分解菌的實驗流程：土壤取樣-→選擇培養(yǎng)-→梯度稀釋-→鑒別培養(yǎng)．請分析回答下列問題：
（1）最好選擇纖維素含量豐富的土壤采集土樣．
（2）配制培養(yǎng)基時，各種成分在溶化后分裝前必須進行調(diào)整PH，接種前要進行高壓蒸汽滅菌．在整個微生物的分離和培養(yǎng)中，一定要注意在無菌條件下進行．在制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的倒平板操作時，平板冷凝后，應將平板倒過來放置，這樣做的目的是防止冷凝水污染培養(yǎng)基．
（3）以下是兩種培養(yǎng)基配方：
A培養(yǎng)基配方：

KH2PO4	Na2HPO4	MgSO4•7H2O	纖維素酶	葡萄糖	尿素	瓊脂
1.4g	2.1g	0.2g	1g	10.0g	1.0g	15.0g

B培養(yǎng)基配方：

KH2PO4	NaNO3	Na2HPO47H2O•	MgSO47H2O•	KCl	纖維素粉	酵母膏	水解因素
0.9g	1g	1.2g	0.5g	0.5g	5g	0.5g	0.5g

如果要分離提純土壤中的纖維素分解菌，應選擇B（填編號）培養(yǎng)基配方，從功能看該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基．
（4）為了鑒別纖維素分解菌和進一步純化菌種，可以在鑒別培養(yǎng)基中加入剛果紅染液，將篩選獲得的菌液稀釋后接種到鑒別培養(yǎng)基上，然后挑選產(chǎn)生透明圈的菌落作為菌種進行擴大培養(yǎng)．

Answer 1

分析 1、培養(yǎng)基的制作過程是：計算、稱量、溶化、調(diào)整pH、分裝、滅菌．倒平板冷凝后，應將培養(yǎng)皿倒置．
2、選擇培養(yǎng)基是指通過培養(yǎng)混合的微生物，僅得到或篩選出所需要的微生物，其他不需要的種類在這種培養(yǎng)基上是不能生存的．
3、剛果紅染液可以與纖維素結(jié)合呈紅色，纖維素酶可以分解纖維素，不能與剛果紅反應呈紅色．

解答 解：（1）篩選目的微生物最好應該到目的微生物含量豐富的地方取樣，所以應當?shù)礁缓�纖維素的天然環(huán)境中采集土壤樣品．
（2）制作培養(yǎng)基時應該先調(diào)整pH，再進行高壓蒸汽滅菌．倒平板冷凝后，應將培養(yǎng)皿倒置，防止冷凝水滴入培養(yǎng)基而污染培養(yǎng)基．
（3）篩選纖維素分解菌應該使用以纖維素為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基．
（4）剛果紅染液可以與纖維素結(jié)合呈紅色，纖維素酶可以分解纖維素，不能與剛果紅反應呈紅色，所以在培養(yǎng)基上含有纖維素分解菌的菌落周圍會出現(xiàn)透明圈．
故答案為：
（1）纖維素含量豐富
（2）高壓蒸汽滅菌　倒過來　防止冷凝水污染培養(yǎng)基
（3）B　選擇
（4）剛果紅染液　透明圈

點評 本題主要考查微生物培養(yǎng)基的制作和目的微生物的篩選與分離，意在強化學生對相關知識點的識記與理解．