Question

19．有些細(xì)菌可分解原油，從而消除有原油泄露造成的土壤污染．某同學(xué)欲從污染的土壤中采用富集培養(yǎng)的方法篩選出高效降解原油的細(xì)菌、經(jīng)過(guò)的一般步驟是采集菌樣→富集培養(yǎng)→純種分離→性能測(cè)定，實(shí)驗(yàn)過(guò)程如圖13所示，請(qǐng)分析回答：

（1）如圖甲、乙是采用純化微生物培養(yǎng)的兩種接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖解，請(qǐng)分析接種的具體方法．

圖A所示的接種方法是稀釋涂布平板法，圖B所示的接種方法是平板劃線(xiàn)法．
（2）在篩選過(guò)程中，應(yīng)將土壤樣品稀釋液接種于以原油為唯一碳源的培養(yǎng)基上，從功能上講，該培養(yǎng)培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基．
（3）制備土壤浸出液時(shí)，為避免菌體濃度過(guò)高，需將浸出液進(jìn)行稀釋處理．現(xiàn)有1L土壤浸出液，用無(wú)菌吸管吸取1mL 液樣至盛有9mL無(wú)菌水的試管中，依次稀釋10³倍．各取0.1mL已稀釋10³ 倍的水樣分別接種到圖A的三個(gè)培養(yǎng)基上培養(yǎng)，記錄的菌落數(shù)分別為55、56、57，則每升原土壤浸出樣液中菌體數(shù)為5.6×10⁸．
（4）①→③重復(fù)培養(yǎng)的目的是增大分解原油微生物的比例．
（5）為篩選出高效菌株，可比較單菌落周?chē)�透明帶區(qū)域的大�。�一般透明帶區(qū)域越大說(shuō)明該菌株降解原油的能力越強(qiáng)．
（6）配制培養(yǎng)基時(shí)各種成分在溶化后分裝前必須進(jìn)行pH調(diào)整，接種前要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，在整個(gè)微生物的分離和培養(yǎng)中，一定要注意在無(wú)菌條件下進(jìn)行．

Answer 1

分析 富集培養(yǎng)技術(shù)實(shí)際是一種選擇分離微生物的技術(shù)，其所用培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基．本題是利用生物對(duì)特殊碳源的需求，配制特殊的培養(yǎng)基來(lái)進(jìn)行生物的篩選，解答過(guò)程中要注意運(yùn)用無(wú)菌操作的一些技術(shù)要求．

解答 解：（1）據(jù)圖分析：圖A中菌落均勻分布，接種方法是稀釋涂布平板法，圖B的接種方法是平板劃線(xiàn)法．
（2）在篩選過(guò)程中，應(yīng)將土壤樣品稀釋液接種于以原油為唯一碳源的培養(yǎng)基上，從功能上講，該培養(yǎng)培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基．
（3）每升原土壤浸出液樣中菌體數(shù)為：（55+56+57）÷3÷0.1×1000×10³=5.6×10⁸ 個(gè)．  
（4）經(jīng)過(guò)①②③的重復(fù)培養(yǎng)，增大了分解原油微生物的比例．
（5）一般情況下，透明帶區(qū)域越大說(shuō)明該菌株的降解對(duì)羥基苯甲酸的能力越強(qiáng)．
（6）培養(yǎng)基制作完成后，需要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌法滅菌．在整個(gè)微生物的分離和培養(yǎng)中，一定要注意在無(wú)菌條件下進(jìn)行．
故答案為：
（1）稀釋涂布平板法   平板劃線(xiàn)法
（2）土壤樣品稀釋液   原油    選擇
（3）5.6×10⁸
（4）增大分解原油微生物的比例
（5）越強(qiáng)
（6）高壓蒸汽滅菌    無(wú)菌

點(diǎn)評(píng) 本題主要考查目的微生物的篩選與培養(yǎng)，意在強(qiáng)化學(xué)生對(duì)目的微生物的篩選過(guò)程的理解與運(yùn)用．