Question

3．根據(jù)基因工程的有關(guān)知識，回答下列問題：
（1）限制性內(nèi)切酶切割DNA分子后產(chǎn)生的片段，其末端有黏性末端、平末端兩種類型．
（2）質(zhì)粒運載體用EcoRⅠ切割后，為使運載體與目的基因相連，含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外，還可用其他限制性限制酶切割，但該酶必須具有的特點是切割產(chǎn)生的DNA片段末端與EcoRI切割產(chǎn)生的相同．
（3）按其來源不同，基因工程中所使用的DNA連接酶有E．coliDNA連接酶和T₄DNA連接酶兩種．
（4）若要在體外獲得大量目的基因，常采用PCR技術(shù)．
（5）若用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌，一般情況下，用Ga²⁺處理的大腸桿菌作為受體細(xì)胞，原因是未處理的大腸桿菌吸收質(zhì)粒（外源DNA）的能力極弱．
（6）若基因工程獲得的蛋白質(zhì)不能滿足人們生產(chǎn)和生活需要，可以利用蛋白質(zhì)工程對其進(jìn)行改造或者重新設(shè)計，蛋白質(zhì)工程的操作主要是對基因進(jìn)行修飾或者人工合成．

Answer 1

分析 基因工程至少需要三種工具：限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）、DNA連接酶、運載體．限制酶能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂，形成黏性末端和平末端兩種．DNA連接酶分為兩類：E．coliDNA連接酶和T₄DNA連接酶．基因工程常用的運載體：質(zhì)粒、噬菌體的衍生物、動植物病毒．

解答 解：（1）經(jīng)限制性核酸內(nèi)切酶切割后能形成兩種類型的末端，即平末端和黏性末端．
（2）為了便于相連，兩種不同限制酶切割之后所產(chǎn)生的黏性末端必須相同．
（3）DNA連接酶分為兩類：E．coliDNA連接酶和T₄DNA連接酶．這二者都能連接黏性末端，此外T₄DNA連接酶還可以連接平末端，但連接平末端時的效率比較低．
（4）利用PCR技術(shù)可以在體外大量擴增目的基因．
（5）當(dāng)受體細(xì)胞是細(xì)菌時，為了增大導(dǎo)入的成功率，常用Ca²⁺處理，得到感受態(tài)細(xì)胞，此時細(xì)胞壁和細(xì)胞膜的通透性增大，容易吸收重組質(zhì)粒．未處理的大腸桿菌吸收質(zhì)粒（外源DNA）的能力極弱．
（6）若基因工程獲得的蛋白質(zhì)不能滿足人們生產(chǎn)和生活需要，可以利用蛋白質(zhì)工程對其進(jìn)行改造或者重新設(shè)計，蛋白質(zhì)工程的操作主要是對基因進(jìn)行修飾或者人工合成．
故答案為：
（1）黏性末端、平末端
（2）切割產(chǎn)生的DNA片段末端與EcoRI切割產(chǎn)生的相同
（3）E．coliDNA連接酶和T₄DNA連接酶
（4）PCR
（5）未處理的大腸桿菌吸收質(zhì)粒（外源DNA）的能力極弱
（6）基因

點評 本題考查基因工程的相關(guān)知識，重點考查基因工程的工具，只要考生識記基因工程三種工具的相關(guān)知識即可，屬于考綱識記層次的考查，這需要考生在平行的學(xué)習(xí)過程中構(gòu)建相關(guān)知識網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)．