Question

13．艾滋病是傳播很廣和危：著極大，且迄今還沒有被完全攻克的疾�。�目前艾滋病病毒的抗體都是從動物細胞中提取，這不僅費時費力，而且價格昂貴，許多艾滋病患者都承受不起．德國研究人員最近開發(fā)出一種新的生產(chǎn)工藝，利用轉(zhuǎn)基因煙草生產(chǎn)抗艾滋病病毒藥物．植物型抗艾滋病藥物的成功開發(fā)，可以大大降低生產(chǎn)抗艾滋病病毒藥物的成本，對治療艾滋病藥物的普及具有重要意義．如圖為制備轉(zhuǎn)基因煙草流程示意圖．
 （1）除圖中目的基因?qū)�人煙草細胞的方法外，�?dǎo)人植復(fù)制物受體細胞的方法還有基因槍法和花粉管通道法．
（2）檢測目的基因是否發(fā)揮功能作用的第一步是檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA，其方法是分子雜交技術(shù)．
（3）將含有目的基因的煙草細胞培養(yǎng)成煙草植株的技術(shù)叫做植物組織培養(yǎng)，其理論基礎(chǔ)是植物細胞具有全能性．若要通過直接培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因煙草細胞獲取藥物，則只需將導(dǎo)人目的基因的煙草細胞培養(yǎng)至愈傷組織，然后大量工廠化生產(chǎn)即可．
（4）在培養(yǎng)過程中，除添加必要的營養(yǎng)物質(zhì)和植物激素，同時提供適宜的溫度、光照和氧氣等環(huán)境條件外，成功的另一關(guān)鍵是無菌操作．
（5）與該培養(yǎng)過程所用培養(yǎng)基相比，用于動物細胞培養(yǎng)的培養(yǎng)液除含有水分、無機鹽、糖類、維生素以及氨基酸等之外，還需要添加動物血清．

Answer 1

分析 基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細胞：根據(jù)受體細胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物細胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（l）圖中將目的基因?qū)�入受體細胞采用的是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，除此之外，將目的基因?qū)�入植物細胞的方法還有基因槍法和花粉管通道法．
（2）檢測目的基因是否發(fā)揮功能作用的第一步是檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄形成mRNA，其方法是分子雜交技術(shù)．
（3）將轉(zhuǎn)基因細胞培養(yǎng)成轉(zhuǎn)基因植株還需采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，其理論基礎(chǔ)是植物細胞具有全能性．獲取細胞產(chǎn)物，只需要將導(dǎo)入目的基因的煙草細胞培養(yǎng)至愈傷組織，再大量工廠化生產(chǎn)即可．
（4）植物組織培養(yǎng)時除提供適宜的溫度、光照和氧氣等環(huán)境條件外，成功的另一關(guān)鍵是無菌操作．
（5）與該培養(yǎng)過程所用培養(yǎng)基相比，用于動物細胞培養(yǎng)的培養(yǎng)液除含有水分、無機鹽、糖類、維生素以及氨基酸等之外，還需要添加動物血清等天然成分．
故答案為：
（1）基因槍法和花粉管通道法
（2）是否轉(zhuǎn)錄出mRNA     分子雜交技術(shù)
（3）植物組織培養(yǎng)      植物細胞具有全能性     愈傷組織
（4）無菌操作
（5）動物血清

點評 本題結(jié)合轉(zhuǎn)基因煙草的培育過程圖解，考查基因工程和細胞工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，掌握各步驟中的相關(guān)細節(jié)；識記植物組織培養(yǎng)的過程、條件及原理等基礎(chǔ)知識，能結(jié)合所學的知識準確答題．