Question

10．微生物與人類關(guān)系密切．雖然有些微生物能使動(dòng)植物患病，但多數(shù)微生物對(duì)人類是有益的．請(qǐng)回答下列問(wèn)題：
（1）培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基配方中一般含有水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽．從土壤中分離分解尿素的細(xì)菌時(shí)，培養(yǎng)基中加的唯一氮源為尿素，這種培養(yǎng)基稱為選擇培養(yǎng)基．
（2）在制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的倒平板操作時(shí)，平板冷凝后，為什么要將平板倒置？皿蓋上會(huì)凝有水珠，防止水珠落入培養(yǎng)皿造成污染，還可使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)．
（3）微生物接種的方法很多，最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法．在用平板劃線法接種時(shí)，為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)第一步灼燒接種環(huán)是防止接種環(huán)上有其他微生物而污染培養(yǎng)基．每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次接種時(shí)留下的菌種，使下一次劃線時(shí)接種環(huán)上的菌種直接來(lái)自上次劃線的末端，以便通過(guò)多次劃線后，得到單個(gè)的菌落．
在劃線操作結(jié)束時(shí)，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？劃線結(jié)束后仍要灼燒接種環(huán)以免菌種對(duì)環(huán)境造成污染．

Answer 1

分析 1、選擇培養(yǎng)基：根據(jù)某種微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)要求或其對(duì)某化學(xué)、物理因素的抗性而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基使混合菌樣中的劣勢(shì)菌變成優(yōu)勢(shì)菌，從而提高該菌的篩選率．
2、微生物常見(jiàn)的接種的方法
①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開(kāi)始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落．
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落．3、劃線分離操作中的有關(guān)問(wèn)題：
（1）在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)，在劃線操作結(jié)束時(shí)，仍然需要灼燒接種環(huán)．

	第一次灼燒	每次劃線之前灼燒	劃線結(jié)束灼燒
目的	避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)基	殺死上次劃線結(jié)束后接種環(huán)上殘留的菌種	殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染或感染操作者

②在灼燒接種環(huán)之后，要等其冷卻后再進(jìn)行劃線，以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種．
③在進(jìn)行第二次以及其后的劃線操作時(shí)'要從上一次劃線的末端開(kāi)始劃線．每次劃線后，線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開(kāi)始，能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來(lái)的菌落．
（2）進(jìn)行恒溫培養(yǎng)時(shí)，要將培養(yǎng)皿倒置的原因如果正放培養(yǎng)皿，則皿蓋上形成的水滴會(huì)落入培 養(yǎng)基表面并且擴(kuò)散開(kāi)．如果培養(yǎng)皿中已形成菌落，則茵落中的細(xì)菌會(huì)隨水?dāng)U散，菌落間相互影響，很難再分成單菌落，達(dá)不到分離的目的．因此恒溫培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)皿必須倒置．
（3）培養(yǎng)后判斷是否有雜菌污染的方法
①?gòu)木�落的形態(tài)看，是否濕潤(rùn)、透明、黏稠，呈何種顏色等等，是區(qū)別細(xì)菌、酵母菌、放線菌和霉菌的關(guān)鍵指標(biāo)．
②用顯微鏡鏡檢觀察其形態(tài)、大小，看是否有菌絲、孢子、芽孢等，這也是區(qū)別細(xì)菌、酵母菌、放線菌和霉菌的關(guān)鍵指標(biāo)．

解答 解：（1）從土壤中分離出分解尿素的細(xì)菌，需用以尿素為唯一氮源的選擇性培養(yǎng)基．
（2）在制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的倒平板操作時(shí)，平板冷凝后，要將平板倒置，因?yàn)槊笊w上會(huì)凝有水珠，防止水珠落入培養(yǎng)皿造成污染，還可使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)．
（3）接種過(guò)程中，最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法兩種方法．每次劃線前都要灼燒接種環(huán)的目的是殺死上次接種時(shí)留下的菌種，使下一次劃線時(shí)接種環(huán)上的菌種直接來(lái)自上次劃線的末端，以便通過(guò)多次劃線后，得到單個(gè)的菌落．操作的第一步和最后一步需灼燒接種環(huán)的目的分別是防止接種環(huán)上有其他微生物而污染培養(yǎng)基、以免菌種對(duì)環(huán)境造成污染．
故答案為：
（1）尿素　選擇　
（2）皿蓋上會(huì)凝有水珠，防止水珠落入培養(yǎng)皿造成污染，還可使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)　
（3）稀釋涂布平板　第一步灼燒接種環(huán)是防止接種環(huán)上有其他微生物而污染培養(yǎng)基．每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次接種時(shí)留下的菌種，使下一次劃線時(shí)接種環(huán)上的菌種直接來(lái)自上次劃線的末端，以便通過(guò)多次劃線后，得到單個(gè)的菌落　劃線結(jié)束后仍要灼燒接種環(huán)以免菌種對(duì)環(huán)境造成污染

點(diǎn)評(píng) 本題考查微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識(shí)記培養(yǎng)基的成分、種類及功能；掌握接種微生物常用的兩種方法，尤其是劃線分離操作中需要注意的有關(guān)問(wèn)題，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查．