Question

15．人們利用轉基因、核移植等技術獲得動物胚胎，移植給受體獲得后代？請回答：
（1）在轉基因過程中，構建基因表達載體常用的工具酶是限制酶和DNA連接酶．日的基因?qū)�入動物細胞最常用的技術是顯微注射技術．
（2）在核移植過程中，從供體內(nèi)獲得體細胞后，對其進行的初次培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)，其細胞數(shù)量達到一定程度后出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象而使細胞停止分裂，需用酶處理使其分散成單個細胞繼續(xù)培養(yǎng)．
（3）用于核移植的供體細胞一般選用傳代10代以內(nèi)的細胞，原因是10代以內(nèi)的細胞能保持正常的二倍體核型；所剛的去核卵母細胞一般處于減數(shù)第二次分裂中期；用于培養(yǎng)供體細胞的培養(yǎng)基中通常含有等天然成分．
（4）胚胎移植時，胚胎在受體內(nèi)存活的生理學基礎是受體對移人子宮的外米胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥 反應；欲獲得遺傳物質(zhì)完全相同的兩個后代，可選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的桑椹胚或囊胚進行胚胎分割，因為該時期的細胞具有全能性．

Answer 1

分析 1、用于核移植的供體細胞一般選用傳代10代以內(nèi)的細胞，原因是10代以內(nèi)的細胞一般能保持 正常的二倍體核型正常的二倍體核型，可以保證供體細胞正常的遺傳基礎”；動物細胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基中通常含有血漿或血清等天然成分．
2、基因工程技術的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物細胞的方法有農(nóng)桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）在轉基因過程中，構建基因表達載體需先用限制酶切割目的基因和運載體，后用DNA連接酶連接．日的基因?qū)�入動物細胞最常用的技術是顯微注射技術．
（2）從供體內(nèi)獲得體細胞后，對其進行的初次培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)，其細胞數(shù)量達到一定程度后出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象，使細胞停止分裂，需用胰蛋白酶處理使其分散成單個細胞繼續(xù)培養(yǎng)．
（3）由于10代以內(nèi)的細胞能保持正常的二倍體核型，故用于核移植的供體細胞一般選用傳代10代以內(nèi)的細胞；所用的去核卵母細胞一般處于減數(shù)第二次分裂中期；用于培養(yǎng)供體細胞的培養(yǎng)基中通常含有血漿或血清等天然成分．
（4）胚胎移植時，胚胎在受體內(nèi)存活的生理學基礎是受體對移人子宮的外米胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應；欲獲得遺傳物質(zhì)完全相同的兩個后代，可選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的桑椹胚或囊胚進行胚胎分割，因為該時期的細胞具有全能性．
故答案為：
（1）限制酶和DNA連接酶  顯微注射技術 
（2）原代培養(yǎng)  接觸抑制 
（3）10代以內(nèi)的細胞能保持正常的二倍體核型   減數(shù)第二次分裂中  血清、血漿 
（4）免疫排斥  桑椹胚或囊胚  全能性

點評 本題考查了基因工程及動物細胞工程在生產(chǎn)實踐中的應用，要求考生識記基因工程的原理、操作工具及操作步驟等，掌握各步驟中的相關細節(jié)，能結合所學的知識準確解答．