Question

【題目】回答下列有關遺傳信息傳遞與表達的問題． 為制備目的基因Y（圖1）與質粒X（圖2）的重組DNA，將質粒X與含Y的DNA片段加入含有限制性核酸內切酶BgⅠⅡ與BamHⅠ的反應混合物中，酶切后的片段再加入含有連接酶的反應體系中．其中，質粒X含有l(wèi)eu2基因，可用于合成亮氨酸，目的基因Y含有卡那霉素抗性基因KanR

（1）根據圖3分別寫出BgⅠⅡ與BamHⅠ酶切后形成的末端序列：、 ．
（2）BgⅠⅡ酶切后的質粒與BamHⅠ酶切后的目的基因Y能夠連接的原因是 ． 將連接后的產物轉化入一種Z細菌，Z細菌對卡那霉素敏感，且不能在缺乏亮氨酸的培養(yǎng)基中培養(yǎng)．
（3）使用BgⅠⅡ處理重組質粒，可以得到 ．
A.長度為3300bp的環(huán)狀DNA
B.長度為3300bp的線形DNA
C.長度為2800bp和500bp的線形DNA
D.長度為2800bp的環(huán)狀DNA
（4）要篩選含有重組質粒的Z細胞，應選擇 ．
A.卡那霉素和亮氨酸均含的培養(yǎng)基
B.卡那霉素和亮氨酸均不含的培養(yǎng)基
C.含卡那霉素但不含亮氨酸的培養(yǎng)基
D.含亮氨酸但不含卡那霉素的培養(yǎng)基．

Answer 1

【答案】
（1）；
（2）酶切后產生相同的黏性末端，并遵循堿基互補配對原則
（3）A
（4）C
【解析】解：（1）限制酶BgⅠⅡ與BamHⅠ的識別序列及切割位點如圖： ，因此它們切割形成的末端序列依次為： 、 ．（2）BgⅠⅡ酶切后的質粒與BamHⅠ酶切后的目的基因Y具有相同的黏性末端，根據堿基互補配對原則，它們能夠連接形成重組DNA．（3）BgⅠⅡ酶切后的質粒與BamHⅠ酶切后的目的基因形成的重組DNA分子上沒有BgⅠⅡ酶的識別序列，因此使用BgⅠⅡ處理重組質粒，可以得到長度為3300bp的環(huán)狀DNA．（4）由于質粒X含有l(wèi)eu2基因，可用于合成亮氨酸，目的基因Y含有卡那霉素抗性基因KanR，因此要篩選含有重組質粒的Z細胞，應選擇含卡那霉素但不含亮氨酸的培養(yǎng)基．
【考點精析】本題主要考查了基因工程的原理及技術的相關知識點，需要掌握基因工程的原理是利用DNA重組技術才能正確解答此題．