Question

【題目】基因工程制藥是制藥行業(yè)的一支新軍，不僅具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)，發(fā)展速度也很快，下圖是應(yīng)用基因工程構(gòu)建皰疹病毒亞單位疫苗的方法，請(qǐng)根據(jù)圖示回答下列問題：

（1）提取單純皰疹病毒DNA后用__________酶切取___________基因作為目的基因，獲取目的基因后，要用__________對(duì)其進(jìn)行擴(kuò)增。

（2）首先，要已知目的基因的_______________，以便人工合成引物。將過量的引物與目的基因混合，加熱到_____℃，使雙鏈DNA解旋成單鏈，之后冷卻到55-60℃，引物與DNA單鏈結(jié)合，下一步，加入_________和4種脫氧核苷酸，升高溫度至70-75℃后，完成互補(bǔ)鏈的合成，如此重復(fù)循環(huán)多次，直到產(chǎn)生足夠供實(shí)驗(yàn)用的目的基因。

（3）提取并剪切牛痘DNA，使其與目的基因連接成重組DNA后，在___________中培養(yǎng)一段時(shí)間后，分離出無害的病毒（疫苗），它含有與______________相同的外殼。

（4）將分離出的疫苗注射到人體內(nèi)，激活人體的______________免疫，產(chǎn)生抗體和記憶細(xì)胞。

Answer 1

【答案】 限制酶 外殼蛋白 PCR技術(shù) 一段核苷酸序列 90—95 Taq酶 活細(xì)胞 單純皰疹病毒 體液

【解析】試題分析：本題考查基因工程、PCR技術(shù)等相關(guān)知識(shí)，解答本題關(guān)鍵是能識(shí)記基因工程的基本步驟，理解PCR技術(shù)的原理，再結(jié)合題意，就能準(zhǔn)確作答。

（1）據(jù)題干信息可知，利用皰疹病毒的蛋白質(zhì)外殼制成疫苗，所以要獲得控制合成皰疹病毒蛋白質(zhì)外殼的基因，即為本實(shí)驗(yàn)的目的基因，常利用特定的限制酶進(jìn)行切割皰疹病毒DNA可以獲取目的基因；如果需要大量的目的基因，則可以通過PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增。

（2）PCR技術(shù)可在體外大量擴(kuò)增目的基因，該技術(shù)的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便合成引物，PCR反應(yīng)中溫度呈現(xiàn)周期性變化，其中加熱到90～95℃使是雙鏈DNA解聚為單鏈，然后冷卻到55-60℃使引物與互補(bǔ)DNA鏈結(jié)合，在加入熱穩(wěn)定性DNA聚合酶和合成DNA的原料，即4種脫氧核苷酸；繼續(xù)加熱到70～75℃，目的是在DNA聚合酶作用下進(jìn)行延伸。

（3）提取并剪切牛痘DNA，使其與目的基因連接成重組DNA，通過顯微注射法將含有牛痘DNA的表達(dá)載體導(dǎo)入到牛的活細(xì)胞中，經(jīng)過一段時(shí)間培養(yǎng)后，可獲得與皰疹病毒相同的外殼。

（4）疫苗注射到人體內(nèi)后，機(jī)體會(huì)產(chǎn)生特異性免疫，在特異性免疫中能產(chǎn)生抗體的只有體液免疫過程。