Question

10．無(wú)菌技術(shù)常使用高壓蒸汽滅菌鍋進(jìn)行滅菌，其使用的正確操作順序是（　�。�
①加水 ②排冷氣 ③裝置滅菌物品 ④100kPa下滅菌  ⑤加蓋 ⑥排氣至0KPa后，打開(kāi)滅菌鍋．

• A． ①③⑤②④⑥
• B． ②③⑤①④⑥
• C． ①②④⑤③⑥
• D． ②⑤①⑥④③

Answer 1

分析 1、高壓滅菌的原理是：在密閉的蒸鍋內(nèi)，其中的蒸汽不能外溢，壓力不斷上升，使水的沸點(diǎn)不斷提高，從而鍋內(nèi)溫度也隨之增加．在0.1MPa的壓力下，鍋內(nèi)溫度達(dá)121℃．在此蒸汽溫度下，可以很快殺死各種細(xì)菌及其高度耐熱的芽孢．
2、注意：完全排除鍋內(nèi)空氣，使鍋內(nèi)全部是水蒸氣，滅菌才能徹底．高壓滅菌放氣有幾種不同的做法，但目的都是要排凈空氣，使鍋內(nèi)均勻升溫，保證滅菌徹底．
3、操作步驟：（1）首先將內(nèi)層滅菌桶取出，再向外層鍋內(nèi)加入適量的水，使水面與三角擱架相平為宜．
（2）放回滅菌桶，并裝入待滅菌物品．注意不要裝得太擠，以免防礙蒸汽流通而影響滅菌效果．三角燒瓶與試管口端均不要與桶壁接觸，以免冷凝水淋濕包口的紙而透入棉塞．
（3）加蓋，并將蓋上的排氣軟管插入內(nèi)層滅菌桶的排氣槽內(nèi)．再以?xún)蓛蓪?duì)稱(chēng)的方式同時(shí)旋緊相對(duì)的兩個(gè)螺栓，使螺栓松緊一致，勿使漏氣．
（4）用電爐或煤氣加熱，并同時(shí)打開(kāi)排氣閥，使水沸騰以排除鍋內(nèi)的冷空氣．待冷空氣完全排盡后，關(guān)上排氣閥，讓鍋內(nèi)的溫度隨蒸汽壓力增加而逐漸上升．當(dāng)鍋內(nèi)壓力升到所需壓力時(shí)，控制熱源，維持壓力至所需時(shí)間．本實(shí)驗(yàn)用 1.05kg/cm2，121.3℃，20分鐘滅菌．
（5）滅菌所需時(shí)間到后，切斷電源或關(guān)閉煤氣，讓滅菌鍋內(nèi)溫度自然下降，當(dāng)壓力表的壓力降至0時(shí)，打開(kāi)排氣閥，旋松螺栓，打開(kāi)蓋子，取出滅菌物品．如果壓力未降到0時(shí)，打開(kāi)排氣閥，就會(huì)因鍋內(nèi)壓力突然下降，使容器內(nèi)的培養(yǎng)基由于內(nèi)外壓力不平衡而沖出燒瓶口或試管口，造成棉塞沾染培養(yǎng)基而發(fā)生污染．
（6）將取出的滅菌培養(yǎng)基放入 37℃溫箱培養(yǎng)24小時(shí)，經(jīng)檢查若無(wú)雜菌生長(zhǎng)，即可待用．

解答 解：高壓蒸汽鍋滅菌的操作步驟：
（1）首先將內(nèi)層滅菌桶取出，再向外層鍋內(nèi)加入適量的水，使水面與三角擱架相平為宜．
（2）放回滅菌桶，并裝入待滅菌物品．
（3）加蓋，并將蓋上的排氣軟管插入內(nèi)層滅菌桶的排氣槽內(nèi)．
（4）用電爐或煤氣加熱，并同時(shí)打開(kāi)排氣閥，使水沸騰以排除鍋內(nèi)的冷空氣．
（5）滅菌所需時(shí)間到后，切斷電源或關(guān)閉煤氣，讓滅菌鍋內(nèi)溫度自然下降，當(dāng)壓力表的壓力降至0時(shí)，打開(kāi)排氣閥，旋松螺栓，打開(kāi)蓋子，取出滅菌物品．如果壓力未降到0時(shí)，打開(kāi)排氣閥，就會(huì)因鍋內(nèi)壓力突然下降，使容器內(nèi)的培養(yǎng)基由于內(nèi)外壓力不平衡而沖出燒瓶口或試管口，造成棉塞沾染培養(yǎng)基而發(fā)生污染．
（6）將取出的滅菌培養(yǎng)基放入37℃溫箱培養(yǎng)24小時(shí)，經(jīng)檢查若無(wú)雜菌生長(zhǎng)，即可待用．
故選：A．

點(diǎn)評(píng) 本題考查微生物的分離和培養(yǎng)，重點(diǎn)考查無(wú)菌技術(shù)，只有考試識(shí)記高壓蒸汽滅菌的具體操作步驟即可正確答題，屬于考綱識(shí)記層次的考查．