Question

14．請(qǐng)回答下列有關(guān)生物及其技術(shù)的問(wèn)題：
（1）在腐乳的制作過(guò)程中，有多種微生物參與了豆腐的發(fā)酵，其中起主要作用的是毛酶．微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成肽和氨基酸，脂肪酶可將脂肪水解為甘油和脂肪酸．
（2）平板劃線法接種時(shí)，如果劃線5個(gè)區(qū)域，灼燒接種環(huán)6次．
（3）某同學(xué)得到10¹、10²、10³倍稀釋液計(jì)數(shù)的平均菌落數(shù)分別為760、269、16，則菌落總數(shù)為2.69×10⁵個(gè)/mL（所用稀釋液的體積為0.1mL）．
（4）選擇培養(yǎng)基能夠“濃縮”所需微生物，“濃縮”的含義是適應(yīng)本環(huán)境的微生物大量繁殖，不適應(yīng)的微生物被抑制．
（5）萃取胡蘿卜素的有機(jī)溶劑應(yīng)該具有較高沸點(diǎn)．萃取時(shí)為了防止加熱時(shí)有機(jī)溶劑揮發(fā)，還要在加熱瓶口安裝回流冷凝裝置．

Answer 1

分析 1、參與腐乳制作的微生物主要是毛霉，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型．腐乳制作的原理：毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪分解成甘油和脂肪酸．
2、平板劃線法接種微生物時(shí)，在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)，在劃線操作結(jié)束時(shí)，仍然需要灼燒接種環(huán)．

	第一次灼燒	每次劃線之前灼燒	劃線結(jié)束灼燒
目的	避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)基	殺死上次劃線結(jié)束后接種環(huán)上殘留的菌種	殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染或感染操作者

3、統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的方法
（1）顯微鏡直接計(jì)數(shù)法
 ①原理：利用特定細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，在顯微鏡下計(jì)算一定容積的樣品中微生物數(shù)量；②方法：用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)； ③缺點(diǎn)：不能區(qū)分死菌與活菌．
（2）間接計(jì)數(shù)法（活菌計(jì)數(shù)法）
 ①原理：當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落，來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌．通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌．
②操作
a、設(shè)置重復(fù)組，增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說(shuō)服力與準(zhǔn)確性．
b、為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)．
③計(jì)算公式：每克樣品中的菌株數(shù)=（c÷V）×M，其中c代表某一稀釋度下平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積（mL），M代表稀釋倍數(shù)

解答 解：（1）在腐乳的制作過(guò)程中，有多種微生物參與了豆腐的發(fā)酵，其中起主要作用的是毛霉．蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成肽和氨基酸，脂肪酶可將脂肪水解為甘油和脂肪酸．
（2）平板劃線法接種時(shí)，每次劃線前都要灼燒接種環(huán)，最后劃線接受后也要灼燒接種環(huán)，因此劃線5個(gè)區(qū)域，需要灼燒接種環(huán)6次．
（3）某同學(xué)得到10¹、10²、10³倍稀釋液計(jì)數(shù)的平均菌落數(shù)分別為760、269、16，為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，因此菌落總數(shù)為269×10²×$\frac{1}{0.1}$=2.69×10⁵個(gè)/mL（所用稀釋液的體積為0.1mL）．
（4）選擇培養(yǎng)基能夠“濃縮”所需微生物，“濃縮”的含義是適應(yīng)本環(huán)境的微生物大量繁殖，不適應(yīng)的微生物被抑制．
（5）萃取胡蘿卜素的有機(jī)溶劑應(yīng)該具有較高的沸點(diǎn)，能夠充分溶解胡蘿卜素，并且不與水混溶等特點(diǎn)．萃取時(shí)為了防止加熱時(shí)有機(jī)溶劑揮發(fā)，還要在加熱瓶口安裝回流冷凝裝置．
故答案為：
（1）毛霉     肽和氨基酸    脂肪酶
（2）6
（3）2.69x10⁵
（4）適應(yīng)本環(huán)境的微生物大量繁殖，不適應(yīng)的微生物被抑制
（5）較高    回流冷凝

點(diǎn)評(píng) 本題考查腐乳的制作、微生物的分離和培養(yǎng)、從生物材料中提取某些有效成分等，對(duì)于此類試題，需要考生注意的細(xì)節(jié)較多，如實(shí)驗(yàn)的原理、實(shí)驗(yàn)采用的方法、實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象的等，需要考生在平時(shí)的學(xué)習(xí)過(guò)程中注意積累．