Question

13．花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病．野生黑芥具有黑腐病的抗性基因．用一定劑量的紫外線處理黑芥原生質(zhì)體可使其染色體片段化，并喪失再生能力．再利用此原生質(zhì)體作為部分遺傳物質(zhì)的供體與完整的花椰菜原生質(zhì)體融合，以獲得抗黑腐病雜種植株．流程如圖1所示：

據(jù)圖回答下列問題：
（1）過程①所需的酶是纖維素酶和果膠酶．過程②后，在顯微鏡下觀察融合的活細胞中有供體的葉綠體存在，這一特征可作為初步篩選雜種細胞的標志．
（2）原生質(zhì)體培養(yǎng)液中需要加入適宜濃度的甘露醇以保持一定的滲透壓，其作用是保持原生質(zhì)體完整性．
（3）若分析再生植株的染色體變異類型，應(yīng)剪取再生植株和植株的根尖，制成臨時裝片，然后在顯微鏡下觀察比較雙親（或花椰菜和黑芥）染色體的形態(tài)和數(shù)目．
（4）采用特異性引物對花椰菜和黑芥基因組DNA進行PCR擴增，得到兩親本的差異性條帶，可用于雜種植株的鑒定．如圖2是用該引物對雙親及再生植株1-4進行PCR擴增的結(jié)果．據(jù)圖判斷，再生植株1-4中一定是雜種植株的有1、2、4．
（5）對雜種植株進行接種實驗，可篩選出具有高抗性的黑腐病菌雜種植株．

Answer 1

分析 分析題圖：圖示為采用植物體細胞雜交技術(shù)獲得抗黑腐病雜種植株的流程圖，其中①表示采用酶解法（纖維素酶和果膠酶）去除細胞壁的過程；②表示誘導原生質(zhì)體融合的過程；之后再采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)即可得到雜種植株．

解答 解：（1）圖中①表示采用纖維素酶和果膠酶去除細胞壁的過程．用于融合的兩個細胞，一個是黑芥苗的葉肉細胞，一個是花椰菜的根部細胞，其中供體細胞特有的結(jié)構(gòu)是葉綠體，因此可通過觀察葉綠體的有無作為初步篩選雜種細胞的標志．
（2）原生質(zhì)體沒有細胞壁的保護，需要加入適宜濃度的甘露醇以保證滲透壓的穩(wěn)定，以避免原生質(zhì)體吸水或失水破壞原生質(zhì)體的完整性．
（3）若分析再生植株的染色體變異類型，應(yīng)剪取再生植株和雙親（或花椰菜和黑芥）植株的根尖，通過解離、漂洗、染色和制片等過程制成裝片，然后在顯微鏡下觀察比較染色體的形態(tài)和數(shù)目．
（4）根據(jù)圖譜，花椰菜含有堿基對為300和600的DNA片段，黑芥還有堿基對為1000、1300和1500的片段，再生植株3，只含有長度為300和600的片段，與花椰菜一致，1、2、4 既含有花椰菜DNA 片段，又含有黑芥DNA片段，為雜種植株．
（5）對雜種植株接種黑腐病菌，能正常生長的即為具有高抗性的雜種植株．
故答案為：
（1）纖維素酶和果膠酶     葉綠體
（2）保持原生質(zhì)體完整性
（3）雙親（或花椰菜和黑芥）
（4）1、2、4
（5）黑腐病菌

點評 本題結(jié)合培育抗黑腐病雜種植株的流程圖，考查植物體細胞雜交的相關(guān)知識，要求考生識記植物體細胞雜交的概念、過程及意義，能正確分析題圖，再結(jié)合所學的知識準確答題．