Question

14．基因工程是在現(xiàn)代生物學、化學和工程學基礎(chǔ)上建立和發(fā)展起來的，并有賴于微生物學理論和技術(shù)的發(fā)展，現(xiàn)在基因工程在動植物育種上有廣泛而重要的應(yīng)用．基因工程基本操作流程如圖所示，請據(jù)圖分析回答問題．
（1）圖中A是運載體，最常用的是質(zhì)粒．
（2）過程②用到的工具酶有限制酶和DNA連接酶．
（3）在基因工程中，核心步驟是基因表達載體的構(gòu)建．其組成除了目的基因外，還必須有啟動子、標記基因以及終止子等，其中啟動子是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位．
（4）轉(zhuǎn)基因綿羊的培育過程，其中③過程常用的方法是顯微注射技術(shù)，使用的綿羊受體細胞為受精卵．
（5）轉(zhuǎn)基因耐鹽棉的培育過程，其中③過程常用的方法有：農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法和基因槍法（或花粉管通道法）法．為了確定轉(zhuǎn)基因耐鹽水稻是否培育成功，既要用放射性同位素標記的耐鹽基因（目的基因）作探針進行分子水平的檢測．又要用一定濃度鹽水澆灌（移栽到鹽堿地中）方法從個體水平鑒定水稻植株的耐鹽性．
（6）用于基因工程的細菌，需要先用Ca⁺處理，使其成為感受態(tài)細胞，容易接受重組DNA．

Answer 1

分析 分析題圖：圖示是基因工程的基本操作流程，其中A為運載體；①目的基因的獲取，②基因表達載體的構(gòu)建，③將目的基因?qū)�人受體細胞，④目的基因的檢測與鑒定．

解答 解：（1）分析圖解，基因工程中需要將目的基因和運載體構(gòu)建成重組質(zhì)粒，因此圖中A是運載體，常用的運載體是質(zhì)粒．
（2）基因表達載體構(gòu)建的過程需要的工具酶有限制酶和DNA連接酶．
（3）在基因工程中，核心步驟是基因表達載體的構(gòu)建．其組成除了目的基因外，還必須有啟動子、標記基因以及終止子等，其中啟動子是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位．
（4）轉(zhuǎn)基因綿羊的培育過程，使用的綿羊受體細胞為受精卵，將目的基因?qū)�入受精過程中常用的方法是顯微注射技術(shù)．
（5）轉(zhuǎn)基因耐鹽棉的培育過程，目的基因?qū)�入植物細胞過程常用的方法有：農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法和基因槍法（或花粉管通道法）法．為了確定轉(zhuǎn)基因耐鹽水稻是否培育成功，既要用放射性同位素標記的耐鹽基因（目的基因）作探針進行分子水平的檢測．又要用一定濃度鹽水澆灌（移栽到鹽堿地中）方法從個體水平鑒定水稻植株的耐鹽性．
（6）用于基因工程的細菌，需要先用Ca⁺處理，使其成為感受態(tài)細胞，容易接受重組DNA．
故答案為：
（1）運載體    質(zhì)粒
（2）限制酶和DNA連接酶
（3）基因表達載體的構(gòu)建      標記基因    終止子    RNA聚合酶
（4）顯微注射技術(shù)     受精卵
（5）基因槍法（或花粉管通道法）     耐鹽基因（目的基因）        一定濃度鹽水澆灌（移栽到鹽堿地中）
（6）Ca⁺

點評 本題結(jié)合基因工程的基本操作流程圖，考查基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理、工具、操作步驟及應(yīng)用；明確目的基因可以在受體細胞中得到表達的生理基礎(chǔ)．