Question

【題目】（一）回答與果酒及果醋制作有關(guān)的問題：

（1）將洗凈的杏果放在多功能榨汁機(jī)中打碎，經(jīng)_________即為杏果汁。榨汁時(shí)不需要對(duì)杏果進(jìn)行嚴(yán)格的消毒處理，這是因?yàn)?/span>_________________。

（2）釀制杏果酒開始時(shí)一般要先通氣，其目的是_________。若要進(jìn)一步檢測(cè)所得杏果酒中活體酵母菌的密度，可采用 ________法。但此種方法最終計(jì)算得出的菌體數(shù)往往比實(shí)際數(shù)目低。

（3）氣溫高的夏天制作成功的杏果酒若暴露在空氣中酒味會(huì)逐漸消失而出現(xiàn)醋酸味，原因是_______。醋桿菌將乙醇變?yōu)榇姿岬沫h(huán)境條件____________是糖源___________（填“充足”“少”）。

（4）杏果酒是目前天然可食植物制品中黃酮含量最高的飲品，具有抗衰老的作用。黃酮易溶于有機(jī)溶劑乙醇，常釆用萃取法提取果肉中的黃酮，振蕩的作用是_______。對(duì)樣品中的黃酮進(jìn)行提取純化后，用比色計(jì)于510nm波長(zhǎng)處測(cè)定其________，與標(biāo)準(zhǔn)溶液比較，進(jìn)行待測(cè)物中黃酮的定量測(cè)定。

（二）回答與基因工程和植物克隆有關(guān)的問題：

（1）用特定的限制性核酸內(nèi)切酶切割含抗蟲基因的DNA分子，把它重組到被限制性核酸內(nèi)切酶切割出________的載體分子上，再把這個(gè)重組分子________到煙草細(xì)胞。

（2）用纖維素酶和果膠酶混合液總理煙草無(wú)菌苗的葉片獲得原生質(zhì)體時(shí)，要加入維持較高滲透壓的甘露醇，理由是__________（寫出2點(diǎn)）。

（3）將原生質(zhì)體在 ________的甘露醇溶液中培養(yǎng)，才能重新長(zhǎng)出細(xì)胞壁，形成胚性細(xì)胞。胚性細(xì)胞在__________培養(yǎng)條件下，經(jīng)過培養(yǎng)基中成分的誘導(dǎo)，可通過________途徑形成完整的煙草植株。

（4）要提高克隆的成功概率，要盡量選擇細(xì)胞_________的基因型的煙草品種。

Answer 1

【答案】過濾 發(fā)酵液缺氧，酵母菌可以生長(zhǎng)繁殖而絕大多數(shù)其他生物受抑制 讓酵母菌在有氧條件下大量繁殖 涂布分離法 醋桿菌 醋桿菌是好氧細(xì)菌，夏季溫度適合醋桿菌快速繁殖和發(fā)酵 缺少 使黃酮充分溶解在乙醇中 光密度值（OD值） 相同粘性末端（匹配末端） 轉(zhuǎn)化（導(dǎo)入、轉(zhuǎn)入、載入） 減少酶解時(shí)間，減少對(duì)細(xì)胞的損傷 等滲 液體 胚胎發(fā)生 全能性表達(dá)充分

【解析】

（一）1、參與果酒制作的微生物是酵母菌，其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。

2、參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理：
當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸。
當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰�，再將乙醛變�(yōu)榇姿帷?/span>

（二）1、基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。
（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。
2、植物組織培養(yǎng)經(jīng)歷的過程是脫分化形成愈傷組織，再分化形成幼根幼芽等，注意植物激素的濃度配比、無(wú)菌操作等。

（一）、（1）將洗凈的杏果放在多功能榨汁機(jī)中打碎，經(jīng)過濾后即為杏果汁。因?yàn)槿毖醭仕嵝缘陌l(fā)酵液中，酵母菌可以生長(zhǎng)繁殖，而絕大多數(shù)其他微生物都因無(wú)法適應(yīng)該環(huán)境而受抑制，榨汁時(shí)不需要對(duì)杏果進(jìn)行嚴(yán)格的消毒處理。

（2）酵母菌在有氧條件下才能繁殖，釀酒先通氣的目的是讓酵母菌在有氧條件下大量繁殖，達(dá)到一定量開開始發(fā)酵。若要進(jìn)一步檢測(cè)所得杏果酒中活體酵母菌的密度，可采用涂布分離法，該方法檢測(cè)活體酵母菌數(shù)時(shí)菌體數(shù)往往比實(shí)際數(shù)目低。

（3）氣溫高的夏天，制作成功的杏果酒若暴露在空氣中酒味會(huì)逐漸消失而出現(xiàn)醋酸味，原因是空氣中含有醋桿菌，醋桿菌是好氧細(xì)菌，最適生長(zhǎng)溫度為30～35℃，夏季溫度適合醋桿菌快速繁殖和發(fā)酵；醋桿菌在缺少糖的有氧條件下才能將乙醇氧化為醋酸。

（4）黃酮易溶于有機(jī)溶劑乙醇，常采用萃取法提取果肉中的黃酮，振蕩的作用是使黃酮充分溶解在乙醇中，黃酮和乙醇充分混勻以利于提取。利用分光光度法于510nm波長(zhǎng)下測(cè)定其光密度值（OD值），與標(biāo)準(zhǔn)溶液比較，進(jìn)行待測(cè)物中總黃酮的定量測(cè)定。

（二）（1）抗蟲基因的DNA分子和的載體分子匹配末端（具有相同的粘性末端）；才能重組，重組DNA分子導(dǎo)入到受體細(xì)胞的過程稱為轉(zhuǎn)化。

（2）用纖維素酶和果膠酶混合液處理煙草無(wú)菌苗的葉片獲得原生質(zhì)體時(shí)，要加入維持較高滲透壓的甘露醇，理由是減少酶解時(shí)間，減少對(duì)細(xì)胞的損傷。

（3）原生質(zhì)體只有在等滲溶液中才能再生細(xì)胞壁，形成胚性細(xì)胞。胚性細(xì)胞在液體培養(yǎng)條件下，經(jīng)過培養(yǎng)基中成分的誘導(dǎo)；可發(fā)生類似受精卵經(jīng)過卵裂、分化、器官發(fā)生和形態(tài)建成而發(fā)育成胚的過程，是通過胚胎發(fā)生途徑形成完整的植株。

（4）要提高克隆的成功概率，要盡量選擇細(xì)胞全能性表達(dá)充分的基因型的煙草品種。