Question

16．為提高我國大豆的含鐵量，科研人員將菜豆的鐵結(jié)合蛋白基因?qū)�入了一個高產(chǎn)大豆品種中，獲得了高含鐵量轉(zhuǎn)基因大豆株系．如圖為培育過程，請分析并回答問題：

（1）獲取鐵結(jié)合蛋白基因用到的“手術(shù)刀”是限制性核酸內(nèi)切酶，圖中②過程采用最多的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法．
（2）圖中的基因表達(dá)載體中，在鐵結(jié)合蛋白基因的首、尾兩端還應(yīng)分別具有啟動子和終止子．
（3）基因表達(dá)載體中的標(biāo)記基因的作用是為了鑒別檢測目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞中是否含有目的基因．檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄，應(yīng)采用分子雜交技術(shù)技術(shù)．
（4）圖中①③過程須在無菌（自然/無菌）條件下進(jìn)行，培養(yǎng)基中除加入必要的營養(yǎng)物質(zhì)外，為促進(jìn)細(xì)胞分裂、生長、分化，還需添加植物激素．
（5）過程④中秋水仙素作用是，在有絲分裂的前期，抑制紡錘體的形成，從而使單倍體植株染色體數(shù)目加倍，成為可育植株．

Answer 1

分析 分析圖解：該轉(zhuǎn)基因水稻的獲得過程為：首先獲取目的基因即鐵結(jié)合蛋白基因，然后構(gòu)建基因表達(dá)載體；同時通過①花藥離體培養(yǎng)的方法獲得愈傷組織；并②將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞，通過③再分化過程培養(yǎng)成為胚狀體，最后④利用秋水仙素使細(xì)胞的染色體數(shù)目加倍，繼而培養(yǎng)成轉(zhuǎn)基因植株，再進(jìn)行目的基因的鑒定．

解答 解：（1）獲取重組載體用到的“手術(shù)刀”是限制性核酸內(nèi)切酶．②過程是將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞，由于水稻屬于雙子葉植物，通常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將重組載體導(dǎo)入愈傷組織細(xì)胞．
（2）基因表達(dá)載體的組成包括啟動子、目的基因、標(biāo)記基因和終止子等．
（3）重組載體中的標(biāo)記基因的作用是檢測目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞．檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄，需用同位素標(biāo)記的鐵結(jié)合蛋白基因作探針，即分子雜交的方法．
（4）圖中基因工程的操作以及植物的組織培養(yǎng)過程須在無菌條件下進(jìn)行，培養(yǎng)基中除加入營養(yǎng)物質(zhì)外，還需添加植物激素（生長素和細(xì)胞分裂素），作用是促進(jìn)細(xì)胞分裂、生長、分化．
（5）秋水仙素的作用是抑制有絲分裂前期紡錘體的形成，進(jìn)而導(dǎo)致細(xì)胞中的染色體數(shù)目加倍．
故答案為：
（1）限制性核酸內(nèi)切酶　農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化
（2）啟動子   終止子
（3）檢測目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞　分子雜交技術(shù)
（4）無菌　植物激素
（5）前    紡錘體

點評 本題綜合考查了基因工程、細(xì)胞工程等有關(guān)知識，要求考生能夠識記基因工程的操作工具、目的基因?qū)�入受體細(xì)胞的方法、目的基因檢測與鑒定的方法；明確秋水仙素作用的結(jié)果；識記植物組織培養(yǎng)過程中植物激素的作用等．