Question

1．寨卡病毒（Zika  virus）是一種主要通過蚊蟲進(jìn)行傳播的病毒，為了對其進(jìn)行防治，科學(xué)家研制出轉(zhuǎn)基因蚊子，即把某段具有致死效應(yīng)的基因（TAC基因）轉(zhuǎn)入到蚊子的體內(nèi)，再將這些轉(zhuǎn)基因蚊子釋放出來，與自然環(huán)境中的蚊子交配，結(jié)果產(chǎn)生不了后代，從而切斷傳播源，其基本思路如圖．
（1）構(gòu)建含有TAC基因的重組質(zhì)粒A，需要用到的工具酶是：限制酶、DNA連接酶．
（2）獲得TAC基因后，短期內(nèi)要得到大量的TAC基因，可利用PCR技術(shù)擴(kuò)增；將重組質(zhì)粒A轉(zhuǎn)入細(xì)胞E，可以用顯微注射法．
（3）若想檢測重組質(zhì)粒是否導(dǎo)入了細(xì)胞E，可以用DNA分子雜交技術(shù)檢測．

Answer 1

分析 基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入動物�?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）構(gòu)建重組質(zhì)粒時，首先要用限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和運(yùn)載體，其次需要用DNA連接酶將目的基因與運(yùn)載體連接形成重組質(zhì)粒．
（2）PCR技術(shù)可在體外大量擴(kuò)增目的基因；將目的基因?qū)�入動物�?xì)胞最有效的方法是顯微注射法．
（3）檢測目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞常用DNA分子雜交技術(shù)．
故答案為：
（1）限制酶       DNA連接酶
（2）PCR      顯微注射
（3）DNA分子雜交

點評 本題結(jié)合圖解，考查基因工程的相關(guān)知識，比較基礎(chǔ)，只要考生識記基因工程的操作工具及操作步驟即可正確答題，屬于考綱識記層次的考查．