Question

【題目】【加試題】回答下列（一）、（二）小題：

（一）請(qǐng)回答與“固定化酶”實(shí)驗(yàn)有關(guān)的問(wèn)題：

（1）—淀粉酶可以通過(guò)培養(yǎng)枯草桿菌來(lái)生產(chǎn)， 是篩選高表達(dá)量菌株的最簡(jiǎn)便方法之一。篩選出的菌株在發(fā)酵生產(chǎn)之前還需利用 培養(yǎng)基進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)。

（2）利用物理或化學(xué)的方法將—淀粉酶固定后，成為 且又有酶活性的制劑。若用吸附法固定時(shí)，在裝柱后需要用 緩慢沖洗，直至流出液不使淀粉-碘混合液發(fā)生 為止。

（3）將淀粉溶液以一定流速?gòu)姆磻?yīng)柱上端滴入，再在下端接取少量流出液進(jìn)行KI-I2顏色測(cè)試，結(jié)果不呈現(xiàn)紅色。對(duì)此現(xiàn)象的解釋錯(cuò)誤的是

A．反應(yīng)柱中沒(méi)有—淀粉酶被固定

B．流速過(guò)快淀粉未被水解

C．接取的流出液是蒸餾水

D．流速過(guò)慢淀粉被水解成葡萄糖

（二）欲利用基因工程技術(shù)將人胰島素基因轉(zhuǎn)入到小鼠基因組中，以期利用小鼠生產(chǎn)出人胰島素，請(qǐng)回答：

（1）若用逆轉(zhuǎn)錄的方法獲得人胰島素基因，則需要從人體相應(yīng)的 細(xì)胞中提取mRNA，獲得的人胰島素基因經(jīng)過(guò)相應(yīng)處理后，再利用顯微注射技術(shù)將其注入到受體細(xì)胞中，下列最不適合作為受體細(xì)胞的是

（A．受精卵B．胚胎干細(xì)胞C．第一次卵裂形成的細(xì)胞D．第三次卵裂形成的細(xì)胞）

（2）為獲得更多的受體細(xì)胞，可先對(duì)成年雌鼠注射激素進(jìn) 處理,將獲得的卵母細(xì)胞培養(yǎng)成熟，與經(jīng) 處理的精子結(jié)合形成受精卵后再進(jìn)行后期操作。

（3）導(dǎo)入胰島素基因的受體細(xì)胞還需借助 、 等技術(shù)才能成為轉(zhuǎn)基因小鼠。

Answer 1

【答案】（一）（1）單菌落分離 液體（2）不溶于水 10倍體積蒸餾水 褪色 （3）D

（二）（1）胰島β細(xì)胞 B （2）超數(shù)排卵獲能 （3）胚胎體外培養(yǎng) 胚胎移植

【解析】

試題分析：（一）（1）要篩選高表達(dá)量菌株的最簡(jiǎn)便方法可以用單菌落分離法，要進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)應(yīng)在液體培養(yǎng)基中。

（2）利用物理或化學(xué)的方法將—淀粉酶固定后，成為不溶于水且又有酶活性的制劑。如果用吸附法固定時(shí)，在裝柱后需要用10倍體積蒸餾水緩慢沖洗，直至流出液不使淀粉-碘混合液發(fā)生褪色為止。

（3）出現(xiàn)紅色說(shuō)明淀粉在固定的淀粉酶作用下被水解，沒(méi)有出現(xiàn)紅色，有可能是反應(yīng)柱中沒(méi)有—淀粉酶被固定，A正確。也有可能是流速過(guò)快淀粉未被水解，B正確。也有可能接取的流出液是蒸餾水，C正確。如果水解成了葡萄糖應(yīng)是紅色，D錯(cuò)誤。

（二）（1）胰島素的mRNA需要從胰島B細(xì)胞中獲取。動(dòng)物受體細(xì)胞最好是受精卵，分化程度越低越好，胚胎干細(xì)胞已經(jīng)是有所分化的細(xì)胞，B最不合適。

（2）要獲得更多的卵細(xì)胞可以用性激素進(jìn)行超數(shù)排卵處理，培養(yǎng)成熟后可以與獲能的精子進(jìn)行體外受精形成受精卵。

（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞后還需要早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)才能發(fā)育成真正的個(gè)體成為轉(zhuǎn)基因小鼠。