Question

【題目】下圖為動物細胞培養(yǎng)的基本過程示意圖。

A　　　 　　　B　　 　 　C　　　　 　　D

請回答：

（1）容器A中放置的一般是幼齡動物的器官或組織，原因是其細胞_________________，易于培養(yǎng)。培養(yǎng)時先要剪碎，然后用____________分散細胞，制成B瓶中的細胞懸液。將細胞懸液轉入C瓶中進行的初次培養(yǎng)稱為___________。

（2）細胞正常培養(yǎng)了一段時間后，發(fā)現(xiàn)細胞絕大部分死亡，只有極少數(shù)細胞存活，這是因為存活的細胞發(fā)生了________，可無限增殖。目前使用的或冷凍保存的正常細胞通常為________代以內，以保持細胞正常的二倍體核型。

（3）C、D瓶中的培養(yǎng)液為保證無菌、無毒的環(huán)境，需要添加一定量的________。培養(yǎng)過程中還需要提供O2和CO2等氣體環(huán)境，CO2的作用主要是_______________。

（4）動物細胞體外培養(yǎng)時，通常要在培養(yǎng)基中補充一定濃度的某些物質。下圖是血清對正常細胞和癌細胞培養(yǎng)影響的實驗結果。

據(jù)圖可知，培養(yǎng)________細胞一定需要添加血清。

Answer 1

【答案】分裂能力強 胰蛋白酶(或膠原蛋白酶) 原代培養(yǎng) 突變 10 抗生素 維持培養(yǎng)液的pH 正常

【解析】

本題主要考查動物細胞培養(yǎng)的過程：

1、動物細胞培養(yǎng)的流程：取動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉入培養(yǎng)瓶中進行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。

2、細胞貼壁和接觸抑制：懸液中分散的細胞很快就貼附在瓶壁上，稱為細胞貼壁．細胞數(shù)目不斷增多，當貼壁細胞分裂生長到表面相互抑制時，細胞就會停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細胞的接觸抑制。

3、動物培養(yǎng)條件：

（1）無菌、無毒的環(huán)境：①消毒、滅菌②添加一定量的抗生素③定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝廢物；

（2）營養(yǎng)物質：糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質；

（3）溫度和pH；

（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細胞代謝必需的）和5%的CO2（維持培養(yǎng)液的pH）。

（1）容器A 中放里的一般是幼齡動物的器官或組織，原因是其細胞分裂能力強，易于培養(yǎng)。培養(yǎng)時先要剪碎，然后用胰蛋白酶分散細胞，制成B 瓶中的細胞懸液．將細胞懸液轉入C 瓶中進行的初次培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)。

（2）細胞正常培養(yǎng)了一段時間后，發(fā)現(xiàn)細胞絕大部分死亡，只有極少數(shù)細胞存活，這是因為存活的細胞發(fā)生了突變，可無限增殖。目前使用的或冷凍保存的正常細胞通常為10代以內，以保持細胞正常的二倍體核型。

（3）C、D 瓶中的培養(yǎng)液為保證無菌、無毒的環(huán)境，需要添加一定量的抗生素。培養(yǎng)過程中還需要提供O2和CO2 等氣體環(huán)境，CO2的作用主要是維持培養(yǎng)液的pH值。

（4）分析曲線圖：是否添加血清對于癌細胞的增殖影響不大，而對于正常細胞增殖影響很大，故培養(yǎng)正常細胞一定需要添加血清。