Question

7．人類在預(yù)防與診療傳染性疾病的過(guò)程中，經(jīng)常使用疫苗和抗體．已知某傳染性疾病的病原體為RNA病毒，該病毒表面的A蛋白為主要抗原，疫苗生產(chǎn)和抗體制備的部分流程如圖：

（1）過(guò)程①代表的是逆轉(zhuǎn)錄．
（2）過(guò)程③構(gòu)建A基因重組載體時(shí)，必須使用限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶兩種工具酶．由過(guò)程③構(gòu)建A基因重組載體，其組成除了目的基因外，還必須有啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因以及復(fù)制原點(diǎn)等．
（3）過(guò)程④要檢測(cè)A基因是否進(jìn)入受體細(xì)胞，常用的方法是DNA分子雜交法；要檢測(cè)A基因在受體細(xì)胞內(nèi)是否翻譯出蛋白質(zhì)，需用抗原抗體雜交法．
（4）與血清抗體相比，單克隆抗體突出的優(yōu)點(diǎn)是特異性強(qiáng)、靈敏度高，并能大量制備．
（5）單克隆抗體的制備過(guò)程中，運(yùn)用了動(dòng)物細(xì)胞工程中的動(dòng)物細(xì)胞融合和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)兩大技術(shù)．
（6）單克隆抗體的制備過(guò)程中，兩次篩選的目的不同，其中第二次篩選的目的是篩選出能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞．篩選時(shí)所用的培養(yǎng)基是特定的選擇性培養(yǎng)基．
（7）舉例說(shuō)出基因工程培育轉(zhuǎn)基因植物的過(guò)程中，微生物能起到的重要作用有工具酶的主要來(lái)源、提供目的基因、提供運(yùn)載體、基因文庫(kù)中的受體細(xì)胞．

Answer 1

分析 分析題圖：圖示為單克隆抗體制備的流程，其中①表示逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程；②是獲取目的基因（A基因）的過(guò)程；③是基因表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程；④是將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞的過(guò)程；⑤是從小鼠皮下獲取已經(jīng)免疫的B細(xì)胞的過(guò)程；⑥表示B細(xì)胞的增殖和分化過(guò)程；⑦是細(xì)胞融合過(guò)程；X為雜交瘤細(xì)胞．

解答 解：（1）由以上分可知①是逆轉(zhuǎn)錄．
（2）構(gòu)建A基因重組載體時(shí)，首先需用限制性核酸內(nèi)切酶切割含有A基因的外源DNA分子和運(yùn)載體，再用DNA連接酶連接A基因和運(yùn)載體形成A基因重組載體．由過(guò)程③構(gòu)建A基因重組載體，其組成除了目的基因外，還必須有啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因以及復(fù)制原點(diǎn)等．
（3）過(guò)程④要檢測(cè)A基因是否進(jìn)入受體細(xì)胞，常用的方法是DNA分子雜交法；要檢測(cè)A基因在受體細(xì)胞內(nèi)是否翻譯出蛋白質(zhì)，需用抗原抗體雜交法．
（4）與血清抗體相比，單克隆抗體突出的優(yōu)點(diǎn)是特異性強(qiáng)、靈敏度高，并能大量制備．
（5）單克隆抗體的制備過(guò)程中，運(yùn)用了動(dòng)物細(xì)胞工程中的動(dòng)物細(xì)胞融合和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)兩大技術(shù)．
（6）在將X進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)之前，至少需要經(jīng)過(guò)兩次篩選，一次是用用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；另一次是用專一抗體檢測(cè)方法篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞．篩選時(shí)所用的培養(yǎng)基是特定的選擇性培養(yǎng)基．
（7）舉例說(shuō)出基因工程培育轉(zhuǎn)基因植物的過(guò)程中，微生物能起到的重要作用有工具酶的主要來(lái)源、提供目的基因、提供運(yùn)載體、基因文庫(kù)中的受體細(xì)胞．
（3）故答案為：
（1）逆轉(zhuǎn)錄
（2）DNA連接酶　終止子、標(biāo)記基因
（3）DNA分子雜交　抗原抗體雜交
（4）特異性強(qiáng)、靈敏度高
（5）動(dòng)物細(xì)胞融合　動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)
（6）能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞　選擇性
（7）工具酶的主要來(lái)源、提供目的基因、提供運(yùn)載體、基因文庫(kù)中的受體細(xì)胞（選填二項(xiàng)，其他合理答案也可）

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合疫苗生產(chǎn)和抗體制備的流程圖，考查基因工程、動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)、單克隆抗體等知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的工具及操作步驟，識(shí)記單克隆抗體的制備過(guò)程，能準(zhǔn)確判斷圖中各過(guò)程的名稱．