Question

18．微生物傳染病是當今世界危害人體健康的大敵．為了研究防治微生物傳染病的有效方法，生物課外課題研究小組的同學要探究板藍根（一種藥用植物）的汁液是否具有抑制大腸桿菌的作用．指導老師為他們提供的材料、儀器和試劑有：大腸桿菌菌種、接種環(huán)、無菌滴管、無菌玻璃刮鏟、無菌圓紙片、鑷子、記號筆、直尺、酒精燈、牛肉膏、蛋白胨、瓊脂、板藍根汁等．研究小組同學的實驗步驟如下：
（1）確定配制的培養(yǎng)基應當為B
A．通用液體培養(yǎng)基
B．通用固體培養(yǎng)基
C．選擇液體培養(yǎng)基
D．選擇固體培養(yǎng)基
（2）制備培養(yǎng)基的操作步驟是b→d→c→e→a．（用下列字母排序）
a．倒置培養(yǎng)基 b．計算 c．溶化 d．稱量 e．滅菌
（3）如果要觀察單個的大腸菌菌落，應該用劃線法接種．
（4）如果要探究板藍根汁液是否具有抑菌作用，可以有以下的實驗方案．
第一步，接種．取A、B兩個平板培養(yǎng)基，用無菌滴管吸取菌液，分別滴在兩個培養(yǎng)基表面，并用無菌玻璃刮鏟涂勻．
第二步，用無菌鑷子將浸過適當濃度的板藍根汁液的圓紙片均勻置于A培養(yǎng)基表面，將浸過無菌水的圓紙片均勻置于B培養(yǎng)基表面．
第三步，把A、B培養(yǎng)基放在37℃恒溫箱中培養(yǎng)2～3天后，在培養(yǎng)皿底部觀察及測量每個圓紙片周圍清晰區(qū)的寬度，測量其寬度并記錄．
第四步，結(jié)果預測及分析．
①若浸過板藍根汁液的圓紙片有清晰區(qū)，而浸無菌水的園紙片沒有清晰區(qū)，則說明板藍根汁液有抑制大腸桿菌的作用．
②若浸有板藍根汁液的圓紙片和無菌水一樣沒有清晰區(qū)，則說明板藍根汁液沒有抑制大腸桿菌的作用．
③若浸無菌水的園紙片沒有清晰區(qū)，而浸過板藍根汁液的圓紙片更不清晰，，則說明板藍根汁液沒有促進大腸桿菌的作用．

Answer 1

分析 傳染病的流行的三個基本環(huán)節(jié)為傳染源、傳染途徑、易感人群；從材料中可以看出，板藍根汁的選擇作用是用圓紙片操作的，所以培養(yǎng)大腸桿菌的固體培養(yǎng)基可以用通用固體培養(yǎng)基；要觀察到單個大腸桿菌菌落，應該用平板劃線法，劃線時注意第一區(qū)域不能與最后區(qū)域相連；含有板藍根汁的圓形紙片為實驗的單一變量，若板藍根汁液具有抑制大腸桿菌的作用，則在圓形紙片周圍因大腸桿菌被抑制而出現(xiàn)清晰區(qū)．

解答 解：（1）從材料中可以看出，板藍根汁的選擇作用是用圓紙片操作的，所以培養(yǎng)大腸桿菌的固體培養(yǎng)基可以用通用固體培養(yǎng)基．
（2）制備培養(yǎng)基的操作步驟是計算→稱量→融化→滅菌→倒平板．
（3）平板劃線法適合觀察單個的大腸桿菌菌落，每次劃線都要從上一次的末尾處開始，注意第一區(qū)域不能與最后區(qū)域相連．
（4）吸取菌液要用無菌滴管，菌液的涂勻要用無菌玻璃刮鏟．實驗的設計注意對照性原則，一個加入含板藍根液的圓形紙片，一個加入含無菌水的圓形紙片形成對照．實驗結(jié)果主要觀察有無清晰區(qū)，若板藍根汁液具有抑制大腸桿菌的作用，則在圓形紙片周圍因大腸桿菌被抑制而出現(xiàn)清晰區(qū)．若板藍根汁液不具有抑制或促進大腸桿菌的作用，則在圓形紙片周圍不會出現(xiàn)清晰區(qū)．
故答案為：
（1）B
（2）b→d→c→e→a
（3）劃線法
（4）第二步：浸過適當濃度的板藍根汁液   浸過無菌水
第三步：在培養(yǎng)皿底部觀察及測量每個圓紙片周圍清晰區(qū)的寬度　
第四步：①如浸過板藍根汁液的圓紙片有清晰區(qū)，而浸無菌水的園紙片沒有清晰區(qū)，說明板藍根汁液有抑制大腸桿菌的作用　
②如浸有板藍根汁液的圓紙片和無菌水一樣沒有清晰區(qū)，說明板藍根汁液沒有抑制大腸桿菌的作用
③若浸無菌水的園紙片沒有清晰區(qū)，而浸過板藍根汁液的圓紙片更不清晰，則說明板藍根汁液沒有促進大腸桿菌的作用

點評 本題主要考查微生物的分離和培養(yǎng)，的難點在于實驗的設計，注意對照原則和單一變量原則．