Question

如圖為某種質粒的簡圖，小箭頭所指分別為限制性核酸內切酶EcoRI、BamHI的酶切位點，P為轉錄的啟動部位．已知目的基因的兩端有EcoRI、BamHI的酶切位點，受體細胞為無任何抗藥性的原核細胞．下列有關敘述正確的是（　　）

• A、將含有目的基因的DNA與質粒分別用EcoRI酶切，在DNA連接酶作用下，生成由兩個DNA片段之間連接形成的產(chǎn)物有兩種
• B、DNA連接酶的作用是將酶切后得到的兩個粘性末端連接起來，形成一個重組質粒時形成4個磷酸二酯鍵
• C、為了防止目的基因反向粘連和質粒自行環(huán)化，酶切時可選用的酶是EcoRI和BamHI
• D、能在含青霉素的培養(yǎng)基中生長的受體細胞表明該目的基因已成功導入該細胞

Answer 1

考點：基因工程的原理及技術

專題：

分析：分析題圖：圖示為某種質粒的簡圖，小箭頭所指分別為限制性核酸內切酶EcoRI、BamHI的酶切位點，P為轉錄的啟動部位，此外該質粒上還有青霉素抗性基因和四環(huán)素抗性基因，且限制性核酸內切酶EcoRI、BamHI的酶切位點位于四環(huán)素抗性基因上．據(jù)此答題．

解答： 解：A、DNA連接酶只能將具有相同黏性末端的DNA片段連接起來，因此將含有目的基因的DNA與質粒分別用EcoRI酶切，在DNA連接酶作用下，生成由兩個DNA片段之間連接形成的產(chǎn)物有3種，即質粒與質粒連接、目的基因與目的基因連接、目的基因與質粒連接，A錯誤；
B、DNA連接酶的作用是將酶切后得到的具有相同末端的DNA片段連接起來，形成一個重組質粒時形成4個磷酸二酯鍵，B錯誤；
C、EcoRI和BamHI切割形成的黏性末端不同，而DNA連接酶只能將具有相同黏性末端的DNA片段連接起來，因此為了防止目的基因反向粘連和質粒自行環(huán)化，酶切時可選用的酶是EcoRI和BamHI，C正確；
D、導入普通質粒的大腸桿菌和導入重組質粒的大腸桿菌都能在含青霉素的培養(yǎng)基中生長，因此能在含青霉素的培養(yǎng)基中生長的受體細胞不一定含有目的基因，D錯誤．
故選：C．

點評：本題結合某質粒圖解，考查基因工程的相關知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，掌握各步驟中的相關細節(jié)，能結合圖中信息準確判斷各選項，屬于考綱識記和理解層次的考查．