Question

回答下列關(guān)于微生物的問題．
資料：
基本培養(yǎng)基：能滿足某一菌種野生型菌株營養(yǎng)要求的最低成分的培養(yǎng)基．
補充培養(yǎng)基：營養(yǎng)缺陷型菌株必須在基本培養(yǎng)基中加入相應(yīng)的一種或幾種營養(yǎng)成分才能正常生長的培養(yǎng)基．
完全培養(yǎng)基：在基本培養(yǎng)基中加入一些富含氨基酸、維生素和堿基之類的天然物質(zhì)，可以滿足該微生物的各種營養(yǎng)缺陷型生長的培養(yǎng)基．
青霉素能抑制細(xì)菌細(xì)胞壁的生物合成，可用于淘汰野生型菌株．
營養(yǎng)缺陷型是一些營養(yǎng)物質(zhì)（如氨基酸、維生素和堿基等）的合成能力上出現(xiàn)缺陷的菌株．某小組同學(xué)選用紫外線為誘變劑，誘發(fā)大腸桿菌（E．coli）突變，期望獲得某種營養(yǎng)缺陷型菌株．用青霉素法淘汰野生型，并檢出缺陷型．
（1）取一環(huán)E．coli置于5mL LB液體三角瓶中，37℃培養(yǎng)一段時間．LB培養(yǎng)液：酵母膏0.5g、蛋白胨1g、NaCl 0.5g、水100mL．LB是

 

培養(yǎng)基，如要配制成固體培養(yǎng)基則要添加

 

．
（2）取培養(yǎng)的菌液離心等處理，加入培養(yǎng)皿中加蓋，置于15W紫外燈下30cm處照射1min，然后打開皿蓋照射1-3min，置于37℃避光培養(yǎng)一段時間．此步驟的目的是

 

．
（3）取上述培養(yǎng)菌液離心等處理后于無氮培養(yǎng)基中37℃培養(yǎng)一段時間；加入含氮的基本培養(yǎng)基和青霉素，再37℃培養(yǎng)一段時間；從培養(yǎng)后的菌液中取0.1mL到含有基本培養(yǎng)基和完全培養(yǎng)基的兩個培養(yǎng)皿中涂布，37℃培養(yǎng)．細(xì)菌先在無氮培養(yǎng)基中培養(yǎng)的目的是消耗體內(nèi)的氮素，停止生長，避免

 

型被以后加入的青霉素殺死．這些步驟的目的是

 

．
（4）如果菌株在基本培養(yǎng)基和完全培養(yǎng)基中的菌落數(shù)大致相等，則說明

 

．對此，可能原因有

 

（寫一點即可）．
（5）選擇在完全培養(yǎng)基中生長的菌落分別點種在劃線對應(yīng)編號的基本培養(yǎng)基（A）和完全培養(yǎng)基（B）上培養(yǎng)．如圖．點種的培養(yǎng)基的先后順序是先基本后完全培養(yǎng)基．選在A上不生長在B上生長的菌落，在基本培養(yǎng)基上劃線，培養(yǎng)．劃線后可能細(xì)菌生長或者不生長，對結(jié)果進(jìn)行分析：

 

．        
（6）對營養(yǎng)物質(zhì)缺陷類型進(jìn)行鑒定的過程，需要用到的培養(yǎng)基

 

（多選）．
A、基本培養(yǎng)基      B、完全培養(yǎng)基   C、補充培養(yǎng)基      D、選擇培養(yǎng)基．

Answer 1

考點：微生物的分離和培養(yǎng)

專題：

分析：大腸桿菌屬于原核生物，細(xì)胞的擬核中只有裸露的DNA，用紫外線處理可以誘發(fā)大腸桿菌的基因突變．液體培養(yǎng)基與固體培養(yǎng)基的區(qū)別是培養(yǎng)基中有沒有加入瓊脂．青霉素可以破壞細(xì)菌細(xì)胞壁中的肽聚糖，可以淘汰的大腸桿菌的野生型菌株．

解答： 解：（1）由于LB培養(yǎng)液的配方中含有酵母膏和蛋白胨，富含氨基酸、維生素和堿基之類的天然物質(zhì)，可以滿足該微生物的各種營養(yǎng)缺陷型生長的培養(yǎng)基，所以是完全培養(yǎng)基．液體培養(yǎng)基與固體培養(yǎng)基的區(qū)別是培養(yǎng)基中有沒有加入瓊脂，如要配制成固體培養(yǎng)基則要添加2%瓊脂．
（2）用紫外線處理可以誘發(fā)大腸桿菌的基因突變．
（3）細(xì)菌先在無氮培養(yǎng)基中培養(yǎng)的目的是消耗體內(nèi)的氮素，停止生長，避免缺陷型被以后加入的青霉素殺死．是由題干中的操作是為了淘汰野生型菌株（濃縮缺陷型菌株）．
（4）根據(jù)題意分析可知，如果菌株在基本培養(yǎng)基和完全培養(yǎng)基中的菌落數(shù)不相等，且菌株在基本培養(yǎng)基少于完全培養(yǎng)基中的菌落數(shù)，說明獲得缺陷型菌株．如果細(xì)菌的突變率低（或紫外線的劑量不夠、紫外線照射時間不夠），則菌株在基本培養(yǎng)基和完全培養(yǎng)基中的菌落數(shù)大致相等，則說明沒有獲得缺陷型菌株．
（5）根據(jù)題意可知，選在A上不生長在B上生長的菌落，在基本培養(yǎng)基上劃線，培養(yǎng)．仍不生長的是缺陷型，生長的是野生型．
（6）根據(jù)題意，營養(yǎng)物質(zhì)缺陷類型的菌株不能在基本培養(yǎng)基上生存，但可以在補充培養(yǎng)基上生存，所以進(jìn)行鑒定時，需要用到基本培養(yǎng)基和補充培養(yǎng)基．
故選：AC．
故答案為：
（1）完全（或通用）  2%瓊脂
（2）誘變
（3）缺陷    淘汰野生型菌株（濃縮缺陷型菌株）
（4）沒有獲得缺陷型菌株    細(xì)菌的突變率低/紫外線的劑量不夠/紫外線照射時間不夠
（5）仍不生長的是缺陷型，生長的是野生型
（6）A、C

點評：本題主要考查微生物的篩選與培養(yǎng)，影響強化學(xué)生對微生物的篩選過程和培養(yǎng)的相關(guān)知識的理解與運用，題目有一定的難度．