Question

【題目】[生物——選修1：生物技術(shù)實(shí)踐]（15分）

某同學(xué)家的門前有一條小溪，近幾年由于上游幾家造紙廠不斷向其中排放廢水，小溪變得不再清澈。某同學(xué)想測(cè)定該溪水中的細(xì)菌含量情況。回答下列問題：

（1）先根據(jù)所學(xué)知識(shí)制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基。制備該培養(yǎng)基的步驟是：計(jì)算→稱量→溶化→滅菌→倒平板，其中滅菌常用的方法是_______________；為了防止培養(yǎng)皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染，所倒平板應(yīng)如何處理？____________________________。

（2）該同學(xué)利用上述制備的培養(yǎng)基來檢測(cè)水樣中的細(xì)菌含量，他所選擇的方法應(yīng)是___________（填“平板劃線法”或“稀釋涂布平板法”）；該同學(xué)在接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空平板先行培養(yǎng)了一段時(shí)間，這樣做的目的是______________________________________________________。值得注意的是，他所選擇的這種方法統(tǒng)計(jì)的結(jié)果往往比實(shí)際細(xì)菌的數(shù)目要低，這是因?yàn)?/span>①___________________________________，②____________________________________________。除了上述的計(jì)數(shù)法外，______________也是測(cè)定微生物數(shù)量的常用方法。

（3）該同學(xué)欲將所分離出的某種細(xì)菌臨時(shí)保藏，應(yīng)選擇的保藏方法是___________________________（填“接種到試管的斜面培養(yǎng)基上，等到菌落長(zhǎng)成后，放入冰箱低溫保藏”或“甘油管藏”）。

Answer 1

【答案】（1）高壓蒸汽滅菌法（1分） 待平板冷凝后，將平板倒置

（2）稀釋涂布平板法 檢測(cè)平板滅菌是否徹底 ①該方法只能統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目，死菌無法統(tǒng)計(jì) ②當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落 顯微鏡直接計(jì)數(shù)

（3）接種到試管的斜面培養(yǎng)基上，等到菌落長(zhǎng)成后，放入冰箱低溫保藏

【解析】（1）對(duì)培養(yǎng)基滅菌常用的方法是高壓蒸汽滅菌法。由于平板冷凝后，皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠，為防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染，需將平板倒置。（2）稀釋涂布平板法可用來統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目，而平板劃線法不能用來統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目，只可用來分離。接種前隨機(jī)取若干滅菌后的空平板先行培養(yǎng)一段時(shí)間的目的是檢測(cè)平板滅菌是否徹底。由于稀釋涂布平板法是通過統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)來代表細(xì)菌數(shù)，因此只能統(tǒng)計(jì)活菌數(shù)，不能統(tǒng)計(jì)死菌；又因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落，因此此方法統(tǒng)計(jì)的結(jié)果比實(shí)際數(shù)目要小。此外，顯微鏡直接計(jì)數(shù)也是測(cè)定微生物數(shù)量的常用方法。（3）臨時(shí)保藏的菌種一般是接種到試管的斜面培養(yǎng)基上，等到菌落長(zhǎng)成后，放入冰箱低溫保藏；而需要長(zhǎng)期保藏的菌種需采用甘油管藏的方法保藏。