Question

18．治療性克隆對解決供體器官缺乏和器官移植后免疫排斥反應(yīng)具有重要意義．流程如下：

（1）過程①采用的是細胞工程中的核移植技術(shù)，過程②采用的是胚胎工程中的（早期）胚胎培養(yǎng)技術(shù)．卵母細胞除從活體輸卵管中采集外，還可以從處死的雌鼠卵巢中獲取．圖中的卵母細胞應(yīng)在體外培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期．
（2）如果克隆過程中需進行基因改造，在構(gòu)建基因表達載體（重組載體）時必須使用限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶兩種工具酶．基因表達載體上除目的基因外，還需有標(biāo)記基因，以便選出成功導(dǎo)入基因表達載體的細胞．
（3）胚胎干細胞可以來自于囊胚中的內(nèi)細胞團．在一定條件下，胚胎干細胞可以分化形成不同的組織器官．若將圖中獲得的組織器官移植給個體B（填“A”或“B”），則不會發(fā)生免疫排斥反應(yīng)．
（4）下表是胚胎干細胞中三種細胞器的化學(xué)成分．

細胞器	蛋白質(zhì)（%）	脂質(zhì)（%）	核酸（%）
甲	67	28	微量
乙	59	40	0
丙	39	0	59

表中丙是核糖體，表中屬于生物膜系統(tǒng)的細胞器有甲和乙，各種生物膜的結(jié)構(gòu)和化學(xué)成分相似，但功能差別較大的原因是蛋白質(zhì)的種類和數(shù)量不同
（5）現(xiàn)有-長度為1000堿基對（by）的DNA分子，用限酶EcoRI酶切后得到的DNA分子仍是1000by，說明此DNA分子為環(huán)狀 （填“線性”或“環(huán)狀”），用Kpn I單獨酶切得到400by和600by兩種長度的DNA分子，用EcoR I、Kpn I同時酶切后得到 200by和600by兩種長度的DNA分子．請繪出該DNA分子的酶切圖譜的示意圖 （請在下框內(nèi)畫圖，并標(biāo)明限制酶的類型、酶切位點和堿基長度）．
．

Answer 1

分析 1、治療性克�。褐咐�用克隆技術(shù)產(chǎn)生特定細胞和組織（皮膚、神經(jīng)或肌肉等）用于治療性移植．
生殖性克隆：指將克隆技術(shù)用于生育目的，即用于產(chǎn)生人類個體．
2、分析題圖：①是核移植技術(shù)，②是早期胚胎培養(yǎng)．
3、動物細胞培養(yǎng)的條件：
（1）無菌、無毒的環(huán)境：①消毒、滅菌；②添加一定量的抗生素；③定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝廢物．
（2）營養(yǎng)物質(zhì)：糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)．
（3）溫度和PH：36.5℃±0.5℃；適宜的pH：7.2～7.4．
（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細胞代謝必需的）和5%的CO₂（維持培養(yǎng)液的PH）．
4．分析表格甲乙丙三種細胞器的組成成分可知，甲是具膜細胞器且含有少量核酸，為線粒體，乙是具膜細胞器，無核酸，可能是內(nèi)質(zhì)網(wǎng)或高爾基體，丙只有蛋白質(zhì)和核酸組成，不具有膜結(jié)構(gòu)，且核酸含量很高，為核糖體．

解答 解：（1）過程①采用的是細胞工程中的核移植技術(shù)，過程②采用的是胚胎工程中的（早期）胚胎培養(yǎng)技術(shù)．對于實驗動物大鼠，如果是從活體輸卵管中采集的卵母細胞，可以直接與獲能的精子在體外受精．如果是從已處死的雌鼠卵巢中采集的卵母細胞，需要在體外經(jīng)人工培養(yǎng)成熟后（減數(shù)第二次分裂中期），才能與獲能的精子受精．
（2）在構(gòu)建基因表達載體（重組載體）時必須使用限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶兩種工具酶．基因表達載體上除目的基因外，還需有標(biāo)記基因以便選出成功導(dǎo)入基因表達載體的細胞．
（3）胚胎干細胞可以來自于囊胚中的內(nèi)細胞團，若將圖中獲得的組織器官移植給個體B不會發(fā)生免疫排斥反應(yīng)．因為B是供核的一方，因此克隆的組織和器官的絕大多數(shù)遺傳物質(zhì)和B相同．
（4）丙只有蛋白質(zhì)和核酸組成，不具有膜結(jié)構(gòu)，且核酸含量很高，為核糖體；甲是具膜細胞器且含有少量核酸，為線粒體；乙是具膜細胞器，無核酸，可能是內(nèi)質(zhì)網(wǎng)或高爾基體．
（5）由于DNA分子用限制酶EcoR1酶切后得到的DNA分子仍是1000bp，說明此DNA分子為環(huán)狀DNA．用Kpn1單獨酶切，得到400bp和600bp兩種長度的DNA分子片段，說明該酶在該DNA分子上具有兩個切點；用EcoRI、Kpnl同時酶切后得到200bp和600bp兩種長度的DNA分子片段，說明EcoRI的切點剛好在400bp片段的中間，由此畫圖即可．因此圖為．
故答案為：
（1）（體細胞）核移植 （早期）胚胎培養(yǎng)  卵巢   減數(shù)第二次分裂中
（2）限制性核酸內(nèi)切酶 DNA連接酶 標(biāo)記
（3）內(nèi)細胞團  B  
（4）核糖體  甲和乙   蛋白質(zhì)的種類和數(shù)量不同
（5）環(huán)狀、

點評 本題考查動物體細胞核移植技術(shù)、治療性克隆等知識，提升學(xué)生分析問題和解決問題的能力，屬于中檔題．