Question

19．用酵母菌生產(chǎn)人的乙型肝炎病毒（HBV）疫苗是第一個真核細胞基因工程的商業(yè)化產(chǎn)品．回答下列問題：
（1）DNA重組技術的基本工具至少有三種，通常用加工處理過的動植物病毒或者質粒作為運載體，DNA連接酶可將HBV的遺傳物質與目的基因連接起來，由此可以知道HBV是DNA （填“DNA”或“RNA”）病毒．
（2）早期基因工程操作常用大腸桿菌作為受體細胞，首先用鈣離子處理細胞，使細胞處于感受態(tài)，從而容易吸收外界DNA分子．導入受體細胞后，目的基因的檢測包括檢測轉基因生物染色體的DNA上是否插入目的基因、目的基因是否轉錄和目的基因能否表達．
（3）用轉基因動物生產(chǎn)藥物時，轉基因動物進入泌乳期后，可以通過分泌的乳汁來生產(chǎn)藥物，因而稱作乳腺發(fā)生器．科學家將基因表達載體用顯微注射的方法注入受精卵中，受精卵在體外發(fā)育成胚胎后通過胚胎移植技術，將其移入受體子宮內(nèi)發(fā)育成轉基因動物．

Answer 1

分析 1、基因工程的基本工具
（1）“分子手術刀”--限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開，因此具有專一性．
（2）“分子縫合針”--DNA連接酶
兩種DNA連接酶（E•coliDNA連接酶和T₄DNA連接酶）的比較：
①相同點：都縫合磷酸二酯鍵．
②區(qū)別：E•coliDNA連接酶來源于大腸桿菌，只能將雙鏈DNA片段互補的黏性末端之間的磷酸二酯鍵連接起來；而T₄DNA連接酶來源于T₄噬菌體，可用于連接粘性末端和平末端，但連接效率較低．
（3）“分子運輸車”--載體：最常用的載體是質粒，它是一種裸露的、結構簡單的、獨立于細菌染色體之外，并具有自我復制能力的雙鏈環(huán)狀DNA分子．
2、基因工程技術的基本步驟：
（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．
（3）將目的基因導入受體細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因導入植物細胞的方法有農(nóng)桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）DNA重組技術的基本工具至少有三種，包括限制酶、DNA連接酶、運載體，加工過的動植物病毒或質粒常作為基因工程的運載體．DNA連接酶能將DNA片段連接起來，若DNA連接酶可將HBV的遺傳物質與目的基因連接起來，則可以說明HBV是DNA病毒．
（2）將目的基因導入微生物細胞常用感受態(tài)轉化法，即用鈣離子處理細胞，使細胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的感受態(tài)．導入受體細胞后，目的基因的檢測過程包括：檢測轉基因生物染色體的DNA上是否插入目的基因，目的基因是否轉錄和目的基因是否表達．
（3）也可以用轉基因動物生產(chǎn)藥物，轉基因動物進入泌乳期后，可以通過分泌的乳汁來生產(chǎn)藥物，因而稱作乳腺發(fā)生器．科學家將基因表達載體用顯微注射的方法注入受精卵中，受精卵在體外發(fā)育成胚胎后通過胚胎移植技術，將其移入受體子宮內(nèi)發(fā)育成轉基因動物．
故答案為：
（1）運載體     DNA
（2）鈣離子     感受態(tài)     轉錄     表達
（3）乳腺發(fā)生器    胚胎移植

點評 本題考查了基因工程以及胚胎工程的有關知識，要求考生能夠識記基因工程的操作步驟，識記基因工程的三種操作工具，掌握目的基因導入細胞的方法，再結合所學知識準確答題．