Question

【題目】大米中鐵含量極低，科研人員通過基因工程等技術，培育出了鐵含量比普通大米高60%的轉(zhuǎn)基因水稻，改良了稻米的營養(yǎng)品質(zhì)。下圖14為培育轉(zhuǎn)基因水稻過程示意圖。

【1】圖中①表示基因工程中的步驟是_________，該步驟需要的工具酶有_________。

【2】為了篩檢成功導入重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌，1號培養(yǎng)基需要加入_______________。誘導組織細胞失去分化的培養(yǎng)基是________。

A．1號培養(yǎng)基 B．2號培養(yǎng)基 C．3號培養(yǎng)基 D．4號培養(yǎng)基

【3】讓農(nóng)桿菌侵入愈傷組織而非水稻胚與幼苗。其主要原因有 。

A.胚與幼苗中導入重組質(zhì)粒的細胞較難發(fā)育成完整轉(zhuǎn)基因植株

B.愈傷組織細胞膜因為損傷較多而有利于接受重組質(zhì)粒

C.3號培養(yǎng)基的作用主要是促進愈傷組織的細胞接受重組質(zhì)粒

D.轉(zhuǎn)基因水稻植株須由轉(zhuǎn)基因細胞分裂與分化而形成

【4】圖中⑤至⑥的過程，屬于_________________技術。

下圖為質(zhì)粒、含目的基因的DNA及其有關限制酶的作用位點。

【5】為提高實驗的效能，應采用限制酶_______處理Ti質(zhì)粒和含目的基因的DNA。

Answer 1

【答案】

【1】 質(zhì)粒與目的基因的重組 限制酶和DNA連接酶

【2】 1號培養(yǎng)基需要加入潮霉素 B

【3】AD

【4】組織培養(yǎng)

【5】BamHI 和 HindIII

【解析】

【1】圖中①表示質(zhì)粒與目的基因的重組，通常要用同一種限制酶分別切割質(zhì)粒和含目的基因的DNA片段，使它們產(chǎn)生相同的黏性末端，然后再用DNA連接酶連接成重組質(zhì)粒。

【2】質(zhì)粒上的標記基因為潮霉素抗性基因，所以需要在1號培養(yǎng)基中加入潮霉素；

水稻細胞經(jīng)過脫分化后可形成愈傷組織失去分化，2號是誘導愈傷組織形成的培養(yǎng)基。

故選B。

【3】讓農(nóng)桿菌侵入愈傷組織而非水稻胚與幼苗，其主要原因是胚與幼苗有一定的分化程度。導入重組質(zhì)粒的細胞較難發(fā)育成完整轉(zhuǎn)基因植株；而愈傷組織沒有分化，形成轉(zhuǎn)基因細胞后則可通過分裂和再分化形成轉(zhuǎn)基因植株。

故選AD。

【4】⑤至⑥的過程，是將已分化的細胞培養(yǎng)成植株，屬于組織培養(yǎng)技術。

【5】由于EcoRⅠ會破壞目的基因，故應采用限制酶BamHI和HindIII處理Ti質(zhì)粒和含目的基因的DNA，以防止自身環(huán)化，同時形成相同的黏性末端。