Question

3．請(qǐng)回答下列有關(guān)單克隆抗體的問(wèn)題：
（1）從免疫的小鼠脾臟細(xì)胞中獲取B淋巴細(xì)胞，與骨髓瘤細(xì)胞融合，形成雜交瘤
細(xì)胞，該細(xì)胞既具備骨髓瘤細(xì)胞的迅速大量繁殖特點(diǎn)，又具備淋巴細(xì)胞的分泌專一抗體特點(diǎn)，經(jīng)過(guò)多次篩選，并通過(guò)體內(nèi)培養(yǎng)或體外培養(yǎng)生產(chǎn)得到所需要的單克隆抗體．
（2）在單克隆抗體的制備過(guò)程中，運(yùn)用的技術(shù)手段是細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞融合．
（3）在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)至細(xì)胞表面相互接觸時(shí)，細(xì)胞會(huì)停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制，要使貼壁的細(xì)胞從瓶壁上分離下來(lái)，可以用胰蛋白酶處理；培養(yǎng)液添加一定量的抗生素，以防止雜菌污染；在含有5% CO₂的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)，CO₂的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH．
（4）單克隆抗體與普通血清抗體相比較，最大優(yōu)點(diǎn)是特異性強(qiáng)、靈敏度高，可大量制備．

Answer 1

分析 1、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程：取動(dòng)物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞用酶分散為單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)．2、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件：
（1）無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境：①消毒、滅菌；②添加一定量的抗生素；③定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝廢物．
（2）營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)．
（3）溫度和PH：36.5℃±0.5℃；適宜的pH：7.2～7.4．
（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細(xì)胞代謝必需的）和5%的CO₂（維持培養(yǎng)液的PH）．
3、單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測(cè)，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體．

解答 解：（1）已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合后形成雜交瘤細(xì)胞，該細(xì)胞既具備骨髓瘤細(xì)胞的迅速大量繁殖特點(diǎn)，又具備淋巴細(xì)胞分泌專一抗體的特點(diǎn)．
（2）在單克隆抗體的制備過(guò)程中，運(yùn)用的技術(shù)手段是動(dòng)物細(xì)胞融合和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)．
（3）在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)至細(xì)胞表面相互接觸時(shí)，細(xì)胞會(huì)停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制；要使貼壁的細(xì)胞從瓶壁上分離下來(lái)，可以用胰蛋白酶處理；培養(yǎng)液添加一定量的抗生素，以防止雜菌污染；在含有5% CO₂的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)，CO₂的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH．
（4）單克隆抗體與普通血清抗體相比較，最大優(yōu)點(diǎn)是特異性強(qiáng)、靈敏度高，可大量制備．
故答案為：
（1）雜交瘤    大量繁殖   分泌專一抗體
（2）細(xì)胞培養(yǎng)   細(xì)胞融合
（3）接觸抑制   胰蛋白酶   抗生素    維持培養(yǎng)液的pH
（4）特異性強(qiáng)、靈敏度高

點(diǎn)評(píng) 本題考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和單克隆抗體的制備，要求考生識(shí)記動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程及條件；識(shí)記制備單克隆抗體的原理及過(guò)程，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題，屬于考綱識(shí)記層次的考查．