Question

【題目】人和哺乳動物的尿含有尿素，大量尿素的存在會對環(huán)境造成污染。土壤中有些細(xì)菌含有脲酶，可通過降解尿素作為其生長的氮源。現(xiàn)對土壤中的這類細(xì)菌進(jìn)行分離實驗，請回答下列問題：

（1）分離培養(yǎng)細(xì)菌時必須進(jìn)行無菌操作，包括培養(yǎng)基和各種器皿都必須是無菌的，常用的滅菌方法有_________（至少答2種）。

（2）將樣液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后接種培養(yǎng)。在稀釋土壤溶液的過程中每一步都要在________旁進(jìn)行操作。接種后的培養(yǎng)皿______于37℃的_______中培養(yǎng)。

（3）用含有酚紅指示劑的培養(yǎng)基篩選能分泌脲酶的細(xì)菌，從功能上劃分該培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基。若培養(yǎng)基中存在有分解尿素的細(xì)菌，其菌落周圍會出現(xiàn)紅色環(huán)帶，這是由于尿素被分解產(chǎn)生的________使pH升高，酚紅指示劑產(chǎn)生的顏色變化，從而證明這一菌株可以尿素為氮源。變色區(qū)域越大，表明該菌株利用尿素的能力_________。

（4）與完全營養(yǎng)培養(yǎng)基中的菌落相比，以尿素為氮源的培養(yǎng)基中菌落數(shù)____________。

A. 多 B. 少 C. 相等 D. 幾乎為零

Answer 1

【答案】高壓蒸汽滅菌、干熱滅菌 酒精燈火焰 倒置 恒溫培養(yǎng)箱 選擇 氨 越強(qiáng) B

【解析】

分離純化某種微生物最關(guān)鍵就是無菌操作技術(shù)，如不能通過高溫高壓加熱滅菌的必須進(jìn)行消毒，能在高溫下滅菌可采用干熱滅菌，為了防止水分蒸發(fā)的可采用高壓蒸汽滅菌等方法；

分離純化土壤中能分解尿素的分解菌，常常在選擇培養(yǎng)基中只添加唯一氮源——尿素，要檢測尿素分解菌是否分泌脲酶分解尿素，可依據(jù)尿素分解產(chǎn)生的氨能讓酚酞指示劑變紅的原理進(jìn)行檢測。如果在加入酚酞指示劑的培養(yǎng)基中存在尿素分解菌的菌落，則菌落周圍會出現(xiàn)紅色圈帶，且紅色圈帶越大，該菌落分解尿素的能力越強(qiáng)。

（1）對培養(yǎng)基和各種器皿滅菌的常用方法是高壓蒸汽滅菌，如果是玻璃或金屬材質(zhì)的各種器皿還可用干熱滅菌。

（2）為了保證無菌操作，在稀釋土壤溶液的過程中每一步都要在酒精燈火焰旁進(jìn)行操作。接種后的培養(yǎng)皿倒置于37℃的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

（3）由于培養(yǎng)基中含有的唯一氮源是尿素，具有篩選功能，所以該培養(yǎng)基從功能上劃分應(yīng)為選擇培養(yǎng)基。由于酚紅指示劑與尿素分解產(chǎn)生氨結(jié)合顯紅色，所以若培養(yǎng)基中存在有分解尿素的細(xì)菌，其菌落周圍會出現(xiàn)紅色環(huán)帶，這是由于尿素被分解產(chǎn)生的氨使pH升高，酚紅指示劑產(chǎn)生的顏色變化，從而證明這一菌株可以尿素為氮源。變色區(qū)域越大，表明該菌株利用尿素的能力越強(qiáng)。

（4）與完全營養(yǎng)培養(yǎng)基中的菌落相比，以尿素為氮源的培養(yǎng)基中菌落數(shù)更少，故選B。