Question

11．IP10是人體某些細胞中表達的細胞因子，為探究IP10對腫瘤細胞免疫應(yīng)答的影響，科學(xué)家進行了有關(guān)研究．請分析回答：

（1）在機體抗腫瘤過程中，特異性免疫和非特異性免疫均發(fā)揮一定作用，細胞免疫過程中主要的效應(yīng)細胞是效應(yīng)T細胞．
（2）獲取IP10基因，構(gòu)建重組質(zhì)粒并導(dǎo)入乳腺腫瘤細胞，篩選成功表達IP10的細胞命名為IP10細胞，將IP10細胞、乳腺腫瘤細胞和導(dǎo)入空質(zhì)粒的乳腺腫瘤細胞分別在體外培養(yǎng)，定期取樣、計數(shù)并繪制生長曲線，結(jié)果如圖1，再將三種細胞分別接種于健康小鼠乳腺部位皮下，觀察小鼠腫瘤生長狀況，結(jié)果如圖2．
①繪制生長曲線時，對腫瘤細胞進行計數(shù)需要使用ac．
a．血細胞計數(shù)板　　b．固體平板培養(yǎng)基　　c．顯微鏡　　d．涂布器
②測定導(dǎo)入空質(zhì)粒的乳腺腫瘤細胞的生長曲線的目的是：排除導(dǎo)入的空質(zhì)粒對乳腺腫瘤細胞增殖的影響．
③據(jù)圖分析，導(dǎo)入IP10基因?qū)�體外培養(yǎng)的乳腺腫瘤細胞的增殖無明顯影響，對體內(nèi)腫瘤的生長有明顯的
抑制作用．
（3）為進一步探究IP10對腫瘤免疫的作用機理，從前面接種了三種不同細胞的小鼠體內(nèi)分離得到脾臟淋巴細胞和腫瘤內(nèi)淋巴細胞，分別加入滅活的乳腺腫瘤細胞作為抗原，適宜條件下培養(yǎng)到54h時，在細胞培養(yǎng)液中加入³H標記的胸腺嘧啶脫氧核苷酸，繼續(xù)培養(yǎng)18h后，收獲細胞并檢測其放射性，結(jié)果如圖3所示．
①在細胞培養(yǎng)液中加入³H標記的胸腺嘧啶脫氧核苷酸的目的是：標記的增殖細胞．
②對照組細胞的處理是：除不加入滅活的乳腺腫瘤細胞外，其他處理與實驗組相同．
③實驗結(jié)果說明：IP10能促進脾臟淋巴細胞和腫瘤內(nèi)淋巴細胞的增殖，從而發(fā)揮抗腫瘤作用．

Answer 1

分析 獲取IP10基因，構(gòu)建重組質(zhì)粒并導(dǎo)入乳腺腫瘤細胞，篩選成功表達IP10的細胞命名為IP10細胞，將IP10細胞、乳腺腫瘤細胞和導(dǎo)入空質(zhì)粒的乳腺腫瘤細胞分別在體外培養(yǎng)，定期取樣、計數(shù)并繪制生長曲線，結(jié)果如圖1，從圖1中可以看出三條曲線的變化趨勢基本一致，所以導(dǎo)入IP10基因?qū)�體外培養(yǎng)的乳腺腫瘤細胞的增殖沒有明顯影響．再將三種細胞分別接種于健康小鼠乳腺部位皮下，觀察小鼠腫瘤生長狀況，結(jié)果如圖2．從圖2中可以看出，導(dǎo)入了IP10基因的細胞使小鼠產(chǎn)生的腫瘤明顯小于其他兩組，所以它對體內(nèi)腫瘤的生長有明顯的抑制作用．從圖3中可以看出“接種IP10細胞的小鼠”實驗組的放射性強度明顯高于其他組，可見IP10基因能夠促進脾臟淋巴細胞和腫瘤內(nèi)淋巴細胞的增殖，進而發(fā)揮抗腫瘤的作用．

解答 解：（1）在機體抗腫瘤的過程中，特異性免疫和非特異性免疫均發(fā)揮作用．細胞免疫過程中，效應(yīng)T細胞與被抗原入侵的宿主細胞（即靶細胞）密切接觸，導(dǎo)致靶細胞裂解死亡．
（2）①在對動物細胞進行計數(shù)時，常采用抽樣檢測法，需要使用血球計數(shù)板和顯微鏡．
②在將IP10基因?qū)�入到乳腺腫瘤細胞中時，是連在質(zhì)粒上導(dǎo)入的，那么在出現(xiàn)相應(yīng)的性狀變化時，也有可能是質(zhì)粒本身所導(dǎo)致的；在導(dǎo)入細胞的過程中，也可能會有未連接目的基因的空質(zhì)粒進入細胞．所以，測定導(dǎo)入空質(zhì)粒的乳腺腫瘤細胞的生長曲線就是為了排除導(dǎo)入的空質(zhì)粒對乳腺腫瘤細胞增殖的影響．
③圖1是對體外培養(yǎng)的細胞進行的測定，圖2是對接種于小鼠體內(nèi)的細胞進行的測定．
從圖1中可以看出三條曲線的變化趨勢基本一致，所以導(dǎo)入IP10基因?qū)�體外培養(yǎng)的乳腺腫瘤細胞的增殖沒有明顯影響．從圖2中可以看出，導(dǎo)入了IP10基因的細胞使小鼠產(chǎn)生的腫瘤明顯小于其他兩組，所以它對體內(nèi)腫瘤的生長有明顯的抑制作用．
（3）①由于3H標記的胸腺嘧啶脫氧核苷酸是構(gòu)成DNA的基本單位．細胞增殖時會進行DNA的復(fù)制，由于此時會利用3H標記的胸腺嘧啶脫氧核苷酸，所以增殖產(chǎn)生的細胞就會被放射性標記．
②該實驗以放射性強度（反映淋巴細胞的增殖情況）作為檢測指標，加入滅活的乳腺腫瘤細胞作為抗原刺激淋巴細胞增殖，為排除其他因素導(dǎo)致的淋巴細胞增殖對結(jié)果的干擾，所以應(yīng)該設(shè)置不加抗原的一組作為對照組．
③由第①可知，放射性強度越高，則淋巴細胞的增殖能力越強．從圖3中可以看出“接種IP10細胞的小鼠”實驗組的放射性強度明顯高于其他組，可見IP10基因能夠促進脾臟淋巴細胞和腫瘤內(nèi)淋巴細胞的增殖，進而發(fā)揮抗腫瘤的作用．
故答案為：
（1）非特異性免疫  T細胞
（2）①a、c
②排除導(dǎo)入的空質(zhì)粒對乳腺腫瘤細胞增殖的影響
③無明顯影響   抑制
（3）①增殖
②滅活的乳腺腫瘤細胞
③促進脾臟淋巴細胞和腫瘤內(nèi)淋巴細胞的增殖

點評 結(jié)合IP10對腫瘤細胞免疫應(yīng)答考查細胞免疫和體液免疫以及對照試驗的設(shè)置和分析，主要考查學(xué)生對實驗的讀圖和綜合分析能力．