Question

11．人工瘤胃模仿了牛羊等反芻動物的胃，可用來發(fā)酵處理秸稈，提高秸稈的利用價值．為了增強發(fā)酵效果，研究人員從牛胃中篩選纖維素酶高產(chǎn)菌株，并對其降解纖維素能力進行了研究．
（1）在樣品稀釋和涂布平板步驟中，下列選項不需要的是C、E（多選）．
A．酒精燈   B．培養(yǎng)皿   C．顯微鏡   D．無菌水   E．接種環(huán)
（2）在涂布平板時，滴加到培養(yǎng)基表面的菌懸液量不宜過多的原因是培養(yǎng)基表面的菌懸液會出現(xiàn)積液，導致菌體堆積，影響分離效果．
剛果紅（CR溶液）可以與纖維素形成紅色復合物，不與纖維素降解產(chǎn)物纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應．下表是兩種培養(yǎng)基的配方，“+”表示有，“-”表示無．

	酵母膏	無機鹽	淀粉	纖維素粉	瓊脂	CR溶液	水
培養(yǎng)基甲	+	+	+	+	-	+	+
培養(yǎng)基乙	+	+	+	-	+	+	+

（3）據(jù)表判斷，培養(yǎng)基甲能否用于分離和鑒別纖維素分解菌？回答并說明理由不能，沒有瓊脂，液體培養(yǎng)基無法分離和鑒別菌種；培養(yǎng)基乙能否用于分離和鑒別纖維素分解菌？回答并說明理由不能，沒有纖維素粉作為（唯一）碳源．
（4）研究人員在剛果紅培養(yǎng)基平板上，篩到了幾株有透明降解圈的菌落（如圖1）． 圖中降解圈大小與纖維素酶的量和活性有關(guān)． 圖中降解纖維素能力最強的菌株是菌2．

（5）研究人員用篩選到的纖維素酶高產(chǎn)菌株 A和 B，在不同溫度和 pH 條件下進行發(fā)酵測得發(fā)酵液中酶活性（U•g^-1protein）的結(jié)果如圖2，推測菌株B更適合用于人工瘤胃發(fā)酵，理由是發(fā)酵過程中會產(chǎn)熱和產(chǎn)酸，B菌在較高溫度和酸性環(huán)境下酶的活性更高．

Answer 1

分析 1、微生物培養(yǎng)的關(guān)鍵是無菌操作：消毒和滅菌

	消毒	滅菌
概念	使用較為溫和的物理或化學方法殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物（不包芽孢和孢子）	使用強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所用的微生物（包括芽孢和孢子）
常用方法	煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學藥劑消毒法、紫外線消毒法	灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌
適用對象	操作空間、某些液體、雙手等	接種環(huán)、接種針、玻璃器皿、培養(yǎng)基等

2、微生物常見的接種的方法
①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落．
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落．
3、剛果紅可以與纖維素形成紅色復合物，當纖維素被纖維素酶分解后，紅色復合物無法形成，出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，我們可以通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌．

解答 解：（1）在樣品稀釋和涂布平板步驟中，都需要使用酒精燈對涂布器進行滅菌，倒平板時需要使用培養(yǎng)皿，稀釋菌液時需要使用無菌水，涂布平板時需要使用涂布器，不需要使用接種環(huán)，也不需要使用顯微鏡．故選：CE．
（2）在涂布平板時，由于培養(yǎng)基表面的菌懸液會出現(xiàn)積液，導致菌體堆積，影響分離效果，所以滴加到培養(yǎng)基表面的菌懸液量不宜過多．
（3）培養(yǎng)基甲沒有瓊脂，屬于液體培養(yǎng)基，而液體培養(yǎng)基無法分離和鑒別菌種，因此培養(yǎng)基甲不能用來分離和鑒別纖維素分解菌．培養(yǎng)基乙不是以纖維素為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基，不能用來進行分離和鑒別纖維素分解菌．
（4）在剛果紅培養(yǎng)基平板上，篩到了幾株有透明降解圈的菌落，降解圈大小與纖維素酶的多少以及活性有關(guān)．纖維素酶的量越多，活性越強，分解的纖維素越多，透明降解圈越大，所以圖中降解纖維素能力最強的菌株是菌2．
（5）據(jù)圖2分析，發(fā)酵過程中會產(chǎn)熱和產(chǎn)酸，B菌在較高溫度和酸性環(huán)境下酶的活性更高，所以菌株B更適合用于人工瘤胃發(fā)酵．
故答案為：
（1）C、E
（2）培養(yǎng)基表面的菌懸液會出現(xiàn)積液，導致菌體堆積，影響分離效果
（3）不能，沒有瓊脂，液體培養(yǎng)基無法分離和鑒別菌種        不能，沒有纖維素粉作為（唯一）碳源
（4）量和活性    菌2
（5）B    發(fā)酵過程中會產(chǎn)熱和產(chǎn)酸，B菌在較高溫度和酸性環(huán)境下酶的活性更高

點評 本題結(jié)合圖表，考查微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識記培養(yǎng)基成分、種類及作用；識記接種微生物常用的兩種方法及無菌技術(shù)，能結(jié)合圖中信息準確答題．