Question

【題目】抗菌肽是一類由昆蟲產(chǎn)生的多肽，同時(shí)具備抗霉菌、廣譜殺菌、抑制病毒、抑殺腫瘤細(xì)胞等多重功能。目前已獲得具有轉(zhuǎn)抗菌肽基因的轉(zhuǎn)基因動(dòng)、植物，均具有較高抗病性。

（1）構(gòu)建基因表達(dá)載體的過程中使用的兩種工具酶是_______。質(zhì)粒作為常用的運(yùn)載體，應(yīng)具備的基本條件有_____________（寫出兩點(diǎn)即可） 。若重組質(zhì)粒如圖甲所示，抗菌肽能否正常表達(dá)______ ，原因是_________。

（2）選用抗菌肽PR39基因培育轉(zhuǎn)基因小鼠時(shí)，應(yīng)將重組質(zhì)粒導(dǎo)入______細(xì)胞；通過________，可直接證明轉(zhuǎn)基因小鼠對細(xì)菌的抵抗力。

（3）選用抗菌肽PR39基因培育轉(zhuǎn)基因植物時(shí)，應(yīng)將重組質(zhì)粒導(dǎo)入其______細(xì)胞，再通過______技術(shù)快速繁殖轉(zhuǎn)基因植物。此過程中，通過調(diào)節(jié)_______ 激素的配比誘導(dǎo)其脫分化與再分化過程。

Answer 1

【答案】 限制性核酸內(nèi)切酶（限制性酶）、DNA連接酶 能夠自我復(fù)制、具有標(biāo)記基因、具有一個(gè)至多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)、需具有啟動(dòng)子和終止子等 否 圖中目的基因插入在啟動(dòng)子的上游，無法開始轉(zhuǎn)錄 受精卵 人工細(xì)菌感染，比較轉(zhuǎn) PR39 基因小鼠與野生型小鼠之間的抗菌能力的差異 （正常）體 植物組織培養(yǎng) 生長素與細(xì)胞分裂素

【解析】試題分析：據(jù)圖分析，圖示為基因表達(dá)載體，其含有的成分有目的基因、啟動(dòng)子、終止子和復(fù)制原點(diǎn)；目的基因插入的位置不在啟動(dòng)子與終止子之間，因此該目的基因不能表達(dá)；該基因表達(dá)載體沒有標(biāo)記基因，不能檢測目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞。

（1）基因工程中，常用的工具酶是限制酶和DNA連接酶；質(zhì)粒作為運(yùn)載體，必須具備的條件是：能夠自我復(fù)制、具有標(biāo)記基因、具有一個(gè)至多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)、需具有啟動(dòng)子和終止子等。根據(jù)以上分析已知，該基因表達(dá)載體上的目的基因不能正常表達(dá)，因?yàn)閳D中目的基因插入在啟動(dòng)子的上游，無法開始轉(zhuǎn)錄。

（2）選用抗菌肽PR39基因培育轉(zhuǎn)基因小鼠時(shí)，一般將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受精卵；通過人工細(xì)菌感染，比較轉(zhuǎn) PR39 基因小鼠與野生型小鼠之間的抗菌能力的差異，可直接證明轉(zhuǎn)基因小鼠對細(xì)菌的抵抗力。

（3）選用抗菌肽PR39基因培育轉(zhuǎn)基因植物時(shí)，一般將重組質(zhì)粒導(dǎo)入其體細(xì)胞，再通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)快速繁殖轉(zhuǎn)基因植物。此過程中，通過調(diào)節(jié)生長素與細(xì)胞分裂素激素的配比誘導(dǎo)其脫分化與再分化過程。