Question

人組織纖溶酶原激活物（htPA）是一種重要的藥用蛋白，可在轉(zhuǎn)htPA基因母羊的羊乳中獲得．流程如下：

（1）將重組表達(dá)載體導(dǎo)入受精卵常用的方法是

 

．檢測(cè)目的基因是否已插入受體細(xì)胞DNA，可采用

 

技術(shù)．
（2）為獲取更多的卵（母）細(xì)胞，要對(duì)供體母羊注射促性腺激素，使其

 

．采集的精子需要經(jīng)過

 

，才具備受精能力．
（3）圖中的卵母細(xì)胞應(yīng)在體外培養(yǎng)到

 

期．
（4）若在轉(zhuǎn)htPA基因母羊的羊乳中檢測(cè)到

 

，說明目的基因成功表達(dá)．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù),胚胎工程的概念及操作對(duì)象,胚胎移植

專題：

分析：基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答： 解：（1）將目的導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法．檢測(cè)目的基因是否已插入受體細(xì)胞DNA，可采用DNA分子雜交技術(shù)．
（2）對(duì)供體母羊注射促性腺激素可促使其超數(shù)排卵．采集的精子需要經(jīng)過獲能處理才具備受精能力．
（3）圖中的卵母細(xì)胞應(yīng)在體外培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期才成熟．
（4）若在轉(zhuǎn)htPA基因母羊的羊乳中檢測(cè)到htPA（或人組織纖溶酶原激活物），說明目的基因成功表達(dá)．
故答案為：
（1）顯微注射法   DNA分子雜交
（2）超數(shù)排卵   獲能（處理）
（3）減數(shù)第二次分裂中期
（4）htPA（或人組織纖溶酶原激活物）

點(diǎn)評(píng)：本題結(jié)合轉(zhuǎn)htPA基因母羊的培育過程圖，考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理、操作工具及操作步驟，掌握各步驟中的相關(guān)細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查．