Question

4．葡萄酒是具有多種營養(yǎng)成分的高級飲料．某同學(xué)制作葡萄酒的過程大致如下：將沖洗過并晾干的成熟葡萄酒捏爛，與糖10：3放入發(fā)酵瓶，攪拌密封后發(fā)酵．初期，泡沫不斷增多，隨著時間的延長，泡沫逐漸減少，待基本不產(chǎn)生氣泡后，結(jié)束發(fā)酵．根據(jù)上述過程，回答以下問題．
（1）發(fā)酵所需酵母菌菌種的來源是葡萄表皮上的酵母菌．
（2）具有耐高糖和耐酸性的酵母菌是理想的酒精發(fā)酵菌種．若項篩選這樣的菌種，步驟如下．
①獲得野生菌：從酵母菌的生存環(huán)境中獲得野生菌；
②制備現(xiàn)在培養(yǎng)基培養(yǎng)基：在基本培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上，注意添加高濃度蔗糖（或葡萄糖）并調(diào)整較低的pH值．滅菌后制成固體平板；
③接種：采用稀釋涂布平板法法將野生菌接種在平板上；
④培養(yǎng)：在適宜條件下培養(yǎng)一定時間；
⑤選種：從能在選擇培養(yǎng)基上生長的菌落中篩選所需要的菌株．
（3）增大接種量能縮短發(fā)酵時間．為增加菌種的量，在上述⑤中獲得所需菌株后，可以采取的措施是擴大培養(yǎng)．
（4）釀酒過程中，經(jīng)檢測發(fā)現(xiàn)活菌數(shù)量適宜卻不產(chǎn)生酒精．在釀酒初期應(yīng)采取的措施是隔絕空氣（或加強密封）．
（5）葡萄汁加入糖的目的是為酵母菌提供碳源，促進發(fā)酵．
（6）密封發(fā)酵后泡沫增多，這時應(yīng)該采取的措施是開蓋放氣．
（7）為研究發(fā)酵瓶中酵母菌的生長狀況，常進行取樣統(tǒng)計分析．一般用顯微計數(shù)法測定酵母菌數(shù)量時常常需要借助一種特制的載玻片-血球計數(shù)板來完成．

Answer 1

分析 1、自然界中目的菌株篩選的依據(jù)：根據(jù)它對生存環(huán)境的要求，到相應(yīng)的環(huán)境中去尋找．
2、實驗室中目的菌株篩選的原理：人為提供有利于目的菌株生長的條件（包括營養(yǎng)、溫度．pH等），同時抑制或阻止其他微生物生長．
3、酵母菌的新陳代謝類型是異養(yǎng)兼性厭氧型．酵母菌發(fā)酵時消耗的糖，大部分形成了酒精和其它發(fā)酵產(chǎn)物，少部分用于自身的生長繁殖．可以采用誘變育種，用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出耐高糖和耐酸特性的酵母菌．培養(yǎng)基滅菌的方法是高壓蒸汽滅菌．平板倒置的目的是防止培養(yǎng)皿蓋上的水滴落在培養(yǎng)基上，使培養(yǎng)基上的菌落隨水?dāng)U散，而不能得到單一的菌落．

解答 解：（1）為了避免葡萄表皮上的酵母菌大量流失，在用葡萄釀制果酒時，不可過度清洗葡萄．
（2）要篩選耐高糖和耐酸特性的酵母菌，則應(yīng)在培養(yǎng)基中添加高濃度蔗糖（葡萄糖）和調(diào)低pH；根據(jù)是否能在選擇培養(yǎng)基上生長篩選出突變菌．
具有耐高糖和耐酸性的酵母菌是理想的酒精發(fā)酵菌種．若項篩選這樣的菌種，步驟如下．
①獲得野生菌：從酵母菌的生存環(huán)境中獲得野生菌；
②制備選擇培養(yǎng)基．在基本培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上，注意添加高濃度蔗糖（葡萄糖）和調(diào)低pH，加瓊脂后滅菌，制成固體平板．
③將菌液稀釋涂布平板法接種．
④培養(yǎng)：在適宜條件下培養(yǎng)一定時間；
⑤根據(jù)是否能在選擇培養(yǎng)基上生長篩選出目的菌．
（3）增大接種量能縮短發(fā)酵時間．為增加菌種的量，在上述⑤中獲得所需菌株后，可以采取的措施是 擴大培養(yǎng)．
（4）酵母菌釀酒過程中，經(jīng)檢測活菌數(shù)量適宜但卻不生產(chǎn)酒精，說明酵母菌通過有氧呼吸大量繁殖，因而不能產(chǎn)生酒精，要使其發(fā)酵產(chǎn)生酒精，應(yīng)隔絕空氣．
（5）葡萄汁加入糖的目的是為酵母菌提供碳源，促進發(fā)酵．
（6）密封發(fā)酵后泡沫增多，說明產(chǎn)生了較多的二氧化碳，故這時應(yīng)該采取的措施是開蓋放氣．
（7）顯微計數(shù)法測定酵母菌數(shù)量時常常需要借助一種特制的載玻片-血球計數(shù)板來完成．
故答案為：
（1）葡萄表皮上附著的野生型酵母菌
（2）②選擇 適量的糖（蔗糖或葡萄糖） 調(diào)整pH
③稀釋涂布平板（或平板劃線） ⑤生長良好的菌落
（3）擴大培養(yǎng)（或多次培養(yǎng)）
（4）隔絕空氣（或加強密封）
（5）為酵母菌提供碳源，促進發(fā)酵
（6）開蓋放氣
（7）血球計數(shù)板

點評 本題考查微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識記培養(yǎng)基的成分、種類及作用；識記實驗室中分離微生物的方法，掌握微生物培養(yǎng)的條件等知識，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題，屬于考綱識記和理解層次的考查．