Question

11．牛等反芻動(dòng)物，具有特殊的器官--瘤胃，在瘤胃中生活著多種厭氧微生物，其中許多微生物以纖維作為碳源．某同學(xué)成功地從瘤胃中分離出能夠分解纖維素的細(xì)菌，其實(shí)驗(yàn)流程如下，取樣稀釋→取稀釋液接種至固體培養(yǎng)基培養(yǎng)→初步篩選出目的菌菌落→進(jìn)一步純化．請(qǐng)回答下列問(wèn)題：
（1）富集培養(yǎng)基的成分為5g纖維素粉、1gNaNO₃、1.2gNa₂HPO₄•7H₂O、0.9gKH₂PO₄、0.5gMgSO₄•7H₂O、0.5gKCL、0.5g酵母膏、0.5g水解酪素，用蒸餾水定容到1000mL，按用途劃分應(yīng)屬于選擇培養(yǎng)基．若要確定該培養(yǎng)基的作用，對(duì)照試驗(yàn)的培養(yǎng)基應(yīng)纖維素粉換成葡萄糖．
（2）鑒定纖維素分解菌的方法是剛果紅染色法，原理為剛果紅與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅-纖維素的復(fù)合物就無(wú)法形成，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，接種的方法是稀釋涂布平板法．
（3）為確定得到的是纖維素分解菌，還需要進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的實(shí)驗(yàn)，其測(cè)定的方法一般是采用對(duì)纖維素酶分解濾紙等纖維素所產(chǎn)生的葡萄糖進(jìn)行定量的測(cè)定，一般認(rèn)為纖維素酶至少包括C₁酶、C₂酶葡萄糖苷酶三種組分．

Answer 1

分析 瘤胃中高度缺氧，所以生活在其中的微生物主要是厭氧厭氧型的微生物．篩選纖維素分解菌分解菌需要以纖維素為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基，微生物接種的方法常用的有平板劃線法和稀釋涂布平板法．纖維素分解菌的鑒定方法是剛果紅染色法．

解答 解：（1）題干所述培養(yǎng)基的配方中的碳源是纖維素粉，只能實(shí)現(xiàn)以纖維素為唯一碳源的微生物，所以是選擇培養(yǎng)基．要確定該培養(yǎng)基的選擇作用，對(duì)照試驗(yàn)的培養(yǎng)基應(yīng)將纖維素粉換成葡萄糖．
（2）鑒定纖維素分解菌的發(fā)生剛果紅染色法，其原理是剛果紅與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅-纖維素的復(fù)合物就無(wú)法形成，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈．
（3）篩選分離得到的纖維素分解菌還需要進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的實(shí)驗(yàn)，測(cè)定的方法一般是采用對(duì)纖維素酶分解濾紙等纖維素所產(chǎn)生的葡萄糖量進(jìn)行定量的測(cè)定．纖維素酶是一種復(fù)合酶，主要包括C₁酶、C₂酶和葡萄糖苷酶．
故答案為：
（1）選擇   纖維素粉換成葡萄糖
（2）剛果紅染色法  剛果紅與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅-纖維素的復(fù)合物就無(wú)法形成，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈    稀釋涂布平板法
（3）纖維素酶  葡萄糖   葡萄糖苷酶

點(diǎn)評(píng) 本題主要考查纖維素分解菌的篩選及培養(yǎng)過(guò)程，意在強(qiáng)化學(xué)生對(duì)相關(guān)知識(shí)的識(shí)記、理解與運(yùn)用．