Question

【題目】【生物-選修1：生物技術(shù)實(shí)踐】毒死蜱(C9H11C13NO3PS)是一種有機(jī)磷殺蟲劑，長期使用將導(dǎo)致土壤中農(nóng)藥殘留嚴(yán)重。某研究小組從長期施藥的韭菜溫室土壤（偏酸性）里分離出能降解毒死蜱的木霉，并對(duì)其降解特性進(jìn)行初步研究。請(qǐng)回答：

（1）用于分離木霉菌種的培養(yǎng)基屬于__________________培養(yǎng)基。配制此培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)加入____________作為唯一碳源。接種前，將培養(yǎng)基在適宜溫度下放置適當(dāng)?shù)臅r(shí)間，觀察培養(yǎng)基__________________，以確定培養(yǎng)基是否被污染。

（2）純化木霉時(shí)，統(tǒng)計(jì)出0.2 mL的稀釋液在稀釋倍數(shù)為105的平板上的平均菌落數(shù)為40個(gè)，則每mL樣液中的菌落數(shù)為__________個(gè)。用此法測(cè)定木霉數(shù)量，實(shí)際活菌數(shù)量要比統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)量______，原因是________________________________________________。

（3）探究pH對(duì)木霉降解毒死蜱活性的影響

①研究小組向不同pH的培養(yǎng)基中分別加入100 mg/L 毒死蜱，5天后檢測(cè)毒死蜱的殘留量（圖1）。由圖可推知：在偏酸性的土壤中，__________________________。

②研究小組向不同pH的培養(yǎng)基中分別加入100 mg/L 毒死蜱，再分別接種1 mL木霉懸液，混合均勻，5天后檢測(cè)毒死蜱的殘留量（圖2）。在此韭菜溫室土壤中，若要提高木霉對(duì)毒死蜱的降解活性，可對(duì)土壤作何處理？_____________________________。

Answer 1

【答案】 選擇 毒死蜱 是否產(chǎn)生菌落 2×107 多 當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落 毒死蜱穩(wěn)定性較好 適當(dāng)提高土壤的pH至7左右

【解析】試題分析：為了純化分離某種特定微生物，都需要配制有特定篩選作用的選擇培養(yǎng)基。根據(jù)活菌落數(shù)估算原培養(yǎng)液中細(xì)菌數(shù)的原理是：一個(gè)細(xì)菌繁殖形成一個(gè)菌落，但由于偶爾會(huì)出現(xiàn)緊鄰的兩個(gè)細(xì)菌繁殖呈同一個(gè)菌落，所以這種方法常常導(dǎo)致估算值偏低。

(1)要分離出能降解毒死蜱的木霉，需要以毒死蜱作為唯一碳源培養(yǎng)基，在該培養(yǎng)基上只有能降解毒死蜱的木霉能生存，其它微生物都不能生存，因此該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。接種前，將培養(yǎng)基在適宜溫度下放置適當(dāng)?shù)臅r(shí)間，觀察培養(yǎng)基是否產(chǎn)生菌落，以確定培養(yǎng)基是否被污染。

(2)純化木霉時(shí)，統(tǒng)計(jì)出0.2mL的稀釋液在稀釋倍數(shù)為105的平板上的平均菌落數(shù)為40個(gè),則每mL樣液中的菌落數(shù)為40×1/0.2×105=2×107個(gè)。用此法測(cè)定木霉數(shù)量，因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落，因此實(shí)際活菌數(shù)量要比統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)量多。

(3)①由圖1可推知：在偏酸性的土壤中，毒死蜱穩(wěn)定性較好。

②由圖2可知，在此韭菜溫室土壤中，若要提高木霉對(duì)毒死蜱的降解活性，可適當(dāng)提高土壤的pH至7左右。